检验仪器分析技术高效液相色谱仪使用、维护与常见故障处理高效液相色谱仪的操作条件选择.pptxVIP

检验仪器分析技术;临床分析化学仪器;基质（担体） 陶瓷性质的无机物基质：硅胶和氧化铝。刚性大，在溶剂中不容易膨胀，传质速度快，柱效高。但其比表面积小，柱容量低，进样量小，要求检测器的灵敏度高；;有机聚合物基质：交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒膨胀，最终使柱效降低。 ;基质种类及其性质;化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。 ;化学键合固定相 键合相的性质：键合相的键合量(常用含碳量(C%)来表示)。硅胶键合相应在pH 2～8的介质中使用。 键合相的种类:极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL) ;非极性键合相主要有各种烷基(C1～C18)和苯基、苯甲基等。;固定相的选择 分离中等极性和极性较强的化合物可选择极性键合相。氰基键合相对双键异构体或含双键数不等的环状化合物的分离有较好的选择性. 分离非极性和极性较弱的化合物可选择非极性键合相 . C18是应用最为广泛的非极性键合相，它对各种类型的化合物都有很强的适应能力。 ;流动相：理想的流动相溶剂应具备以下特征： 不改变填料的性质； 纯度； 必须与检测器匹配； 低粘度； 对样品较好的溶解度； 样品易于回收，应选用挥发性溶剂。 ;流动相的选择:在化学键合相色谱法中，溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。 在正相色谱中，溶剂的洗脱强度随极性的增强而增加；正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。 ;在反相色谱中，溶剂的洗脱强度随极性的增强而减弱。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。甲醇-水系统是反相色谱最常用的流动相。乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。但乙腈毒性和价格均较甲醇高。 ;HPLC用水： HPLC应用中要求超纯水，如检测器基线的校正和反相柱的洗脱。;柱温： 色谱柱及某些检测器都要求能准确地控制工作环境温度，柱子的恒温精度要求在±0.5℃之间。 温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的性能、流动相的粘度都有影响。 为保持柱温的恒定，HPLC一般都配置有柱温箱。 ;