增强免疫力功能评价方法(征求意见稿)及修订说明[汇编].docxVIP

方 法 汇 编 20XX method E 附件1： 增强免疫力功用点评办法（寻求定见稿） 保健食品点评试验项目、试验准则及成果断定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项目 1.1 动物试验 1.1.1 体重 1.1.2脏器/体重比值测定：胸腺/体重比值，脾脏/体重比值 1.1.3细胞免疫功用测定：小鼠脾淋巴细胞转化试验，迟发型变态反响试验 1.1.4体液免疫功用测定：抗体生成细胞检测，血清溶血素测定 1.1.5单核—巨噬细胞功用测定：小鼠碳澄清试验，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球试验 1.1.6 NK细胞活性测定 2 试验准则 2.1 所列的目标均为必做项目 2.2分为正常动物试验计划和免疫功用低下模型动物试验两种计划, 可任选其一进行试验. 2.3选用免疫功用低下动物模型试验计划时需做外周血白细胞总数测定 3 成果断定 3.1选用正常动物试验，受试样品具有增强免疫力效果。 在细胞免疫功用、体液免疫功用、单核－巨噬细胞功用及NK细胞活性四个方面测定中，任两个方面试验成果为阳性，能够断定该受试样品具有增强免疫力效果。 其间细胞免疫功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，断定细胞免疫功用试验成果阳性。体液免疫功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，断定体液免疫功用试验成果阳性。单核—巨噬细胞功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，断定单核—巨噬细胞功用试验成果阳性。NK细胞活性测定试验的一个以上剂量成果阳性，断定NK细胞活性成果阳性。 正常动物试验需进行四个方面的测定。 3.2 选用免疫功用低下动物试验，受试样品对免疫功用低下者具有增强免疫力效果。 在免疫功用低下模型树立条件下，血液白细胞总数、细胞免疫功用、体液免疫功用、单核－巨噬细胞功用及NK细胞活性五个方面测定中，任两个方面试验成果为阳性，断定该受试样品对免疫功用低下者具有增强免疫力效果。 其间细胞免疫功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，或任一个试验的两个剂量组成果阳性，可断定细胞免疫功用试验成果阳性。体液免疫功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，或任一个试验的两个剂量组成果阳性，可断定体液免疫功用试验成果阳性。单核—巨噬细胞功用测定项目中两个试验的成果均为阳性，或任一个试验的两个剂量组成果阳性，可断定单核—巨噬细胞功用试验成果阳性。NK细胞活性测定试验的一个以上剂量成果阳性，能够断定NK细胞活性成果阳性。血液白细胞总数测定的二个以上剂量成果阳性，能够断定血液白细胞总数成果阳性。 免疫功用低下模型动物试验至少需进行三个方面的测定。一同在各项试验中，任何一项测验都不呈现加剧免疫按捺剂效果的成果。 增强免疫力功用查验办法 Method for the Assessment of Enhancing Immune Function 原理：免疫系统首要包含中心和外周淋巴器官、淋巴安排和全身遍地的淋巴细胞、抗原呈上细胞等，还包含血液中的白细胞。淋巴细胞经血液和淋巴使遍地的淋巴器官和淋巴安排连成一个功用全体。胸腺属中心淋巴器官，首要功用是保证T淋巴细胞的发生和成熟。外周淋巴器官包含血液、淋巴管和免疫活性细胞；脾脏对抗原发生免疫应对效果，脾窦的巨噬细胞具有铲除功用，脾白髓含有回忆B细胞，发生对T依靠抗原的体液免疫应对。淋巴细胞是特异性免疫应对的首要细胞群，按其外表标志物，分为T细胞、B细胞和天然杀伤细胞（NK）三大类，T细胞又分为CD4+（Th）细胞和CD8+T淋巴细胞。B淋巴细胞转化为浆细胞后能组成和开释抗原特异抗体，一切抗体都是免疫球蛋白，但并非一切的免疫球蛋白分子都具有抗体功用。免疫系统可发生 特异性免疫和非 特异性免疫功用，检测上述免疫系统的各种代表性目标的改动可对增强免疫力效果的功用做出相应断定。 试验动物挑选引荐用近交系小鼠，如C57BL/6J、BALB/C等，6～8周龄，18～22g（BALB/C种可16-18g），单一性别，男女均可，每组10～15只。 剂量分组及受试样品给予时刻 试验设三个剂量组和1个阴性对照组。以人体引荐量的10倍为其间一个剂量，另设二个剂量组。必要时设阳性对照组。选做免疫低下模型法时，应设模型对照组。受试样品给予时刻四周或30天。 4．免疫功用低下动物模型 可选用环磷酰胺、氢化可的松或其他适宜的免疫按捺剂进行药物造模。 4.1 造模原理： 4.1.1环磷酰胺首要通过DNA烷基化损坏DNA的组成而非特异性地杀伤淋巴细胞，并可按捺淋巴细胞转化；环磷酰胺对B细胞的按捺比T细胞强，一般对体液免疫有很强的按捺效果，对NK细胞的按捺效果较弱。 4.1.2氢化可的松首要通过与相应受体结组成复合物后进入细胞核，阻挠NF-κB进入细胞核，按捺细胞因子与炎症介质的组成和开释，到达免疫按捺意图。氢化可的松