FluorChemQ凝胶成像分析系统在科研实验及教学中的应用-精选教育文档.docx

FluorChem Q 凝胶成像分析系统在科研实验及教学中 的应用 Application of FluorChem Q gels image acquisition and analysis system in scientific research and teaching Pan Hongchao, Tang Danyang Shantou university, Shantou, 515041, China : Gel imaging analysis system in biological and medical research has become more and more important. This paper primarily elaborated the application of the advanced FluorChem Q gel imaging systems, which had been applied to practice in teaching. This introduction made scientific research workers further understanding thr FluorChem Qgel imaging systems, and made students preliminarily understand it s application. The students practice skills were improved, and also achieve theory combined with practice in teaching. 凝胶成像分析系统及图像分析软件主要应用于生物、 医学及 医药研究领域，可用于拍摄核酸及蛋白电泳、菌落技术，还可用 于荧光图像的采集，定量及半定量分析 [1-3] ，为科研人员提供 了快捷方便的分析凝胶图像及相关生物学实验的工具。 FluorChem Q 是顶级的多色荧光、化学发光、可见光成像和定量 分析系统，是目前同类产品中唯一兼顾多种应用的成像系统 （如 图 1所示） 。在一次分析中可同时检测 5种蛋白 ,并对其进行定量 分析。先进的CCD技术提高了成像的速度和定量分析的能力。 将 凝胶成像分析系统运用到本科及研究生实验教学中， 可使学生了 解相关领域较先进的研究方法和技术， 有助于提高学生的实践能 力及科学思维，培养复合型人才 [4] 。为此，以 Alpha Innotech 公司的FluorChem Q凝胶成像系统以及数据处理软件，初步阐述 其在图像获取、存储、密度扫描及定量等方面的应用。 实验图像的采集和存储 打开电脑进入 Windows界面后，开启暗箱电源及相机电源。 双击桌面上的 Alpha 软件图标，在工具栏选择 Acquire ，进入图 像捕获界面。仪器所配 CCD镜头自动制冷至-20C条件后才能较 好地工作，所以需要提前半小时左右打开仪器预冷。然后在 Cameral Set Preview（相机设计预览）窗口点击紫色Focus（聚焦） 按钮。打开暗箱门，将样本依据其所需要的光源位置摆好。以核 酸电泳及蛋白电泳采像为例， 对于普通核酸凝胶采像， 要移走可 抽挡板（如图 1所示），把凝胶置于投射紫外灯箱上 （图1标有 DNA/RNA。） 对于蛋白化学发光样品采像，插入可抽挡板 （如图 1 所示） ，把已孵有发光液的膜置于可抽挡板上 （图 1中标有 Protein） 。在不同操作时，要注意对焦。对焦步骤如下：打开镜 头光圈， 注意镜头光圈上数字越小光圈越大。 在暗箱门打开的情 况下，利用外界自然光线及显示器上实时显示的图像来调整样品 位置，将其置于图像的最中心处，并聚焦至最佳状态，使图像看 起来最清晰。调节ZOOM使样品尽可能占据整个图像。关闭暗箱 门，选择一个合适的滤光片，1号位：无滤光片；2号位：EB滤 光片；3?5号位：荧光通道。对于核酸电泳图像采集，我们选 用 2 号位；对于蛋白电泳图像采集，我们选用 1 号位。凝胶采像 结果如图2A和图2B所示，荧光图像采集根据要求用 3?5号位 采集图像，结果如图2C所示。 图1 FluorChem Q凝胶成像分析系统示意图及自带分析功能 图2图像采集结果（A-核酸凝胶成像图；B-蛋白化学发光 图；C—蛋白荧光发光图） 打开相应的光源，选择绿色的 Expose Preview（ 曝光预览 ） 按钮，检查饱和度，如果图像饱和度正常，点击Acqure lmage（获 取图像）按钮，曝光进度条在完成自动曝光后会显示绿色；如果 饱和度不正常或者自动曝光，则不能正常完成 （曝光进度条显示 为粉色），通常情况下为光圈过大造成，需调小光圈。也可以根