《杨在清》第14章DNA的复制、修复与重组.docxVIP

第14章 DNA的复制、修复与重组 一、学大纲基本要求 DNA的复制过程、损伤与修复、 DNA重组类型。DNA的复制过程中的半保留复制 ，复制起点和复制方 式，DNA聚合反应有关的酶，DNA的半不连续复制，DNAM制的拓扑性质，DNAM制体的结构，大肠杆菌DNA 复制的过程，真核生物 DNA的复制，DNA复制的调控。DNA的损伤及修复，错配修复，光复活，切除修复， 重组修复，应急反应及易错修复。 DNA的重组，同源重组，特异位点重组和转座重组。 二、本章知识要点 （一） DNA的复制 1、 DNA的半保留复制（Semiconservative replication ） 复制时DNA的两条链分开，分别作为模板合成新的互补链而形成两个 一条链来自亲代DNA另一条则是新合成的。 2、 DNAM制的起点和方式 基因组能独立进行复制的单位称为复制子。每个复制子都含有复制起点和终点。在复制的部位形 成叉形结构，称为复制叉。复制方向大多数是定点双向，起点一个或多个（原核生物 1个起点，真核生物 多个起点）。DNA复制的方式有：单起点双方向，多起点双方向，环状 DNA）型双方向，环状 DNA0型单方 向，滚动环式（噬菌体 0 X174DNA和D-环式（线粒体 3、 DNA聚合反应有关的酶 （1） DNA分子。子代DNA分子的 DNA是单向复制的特殊方式。 n idAT P + n 2dGT P n 3dCT P DNA聚合反应 DNA聚合酶 ? 2+ DNA模板，RNA引物，Mg 厂 dAMP dGMP dCMP + ( ni+ n2+ n3+ nJ PPi n 4dTT P 引物酶：合成 RNA引物，弓I物酶与有关蛋白质形成引发体 DNA聚合酶 大肠杆菌DNA聚合酶有五种: DNA聚合酶I DNA 聚合 酶n DNA聚合酶川 5、3/聚合作用 + + + 3/7 5 /外切酶 + + + 5/7 3 /外切酶 + - + 主要功能 DNA的损伤修复 DNA的损伤修复 DNA复制酶 RNA引物切除并聚合 DNA聚合酶W和V涉及 DNA的错误倾向修复。当 DNA受到较严重损伤时，可诱导产生这两个酶, 它们能在损伤部位继续复制而造成错误倾向的复制。  哺乳动物DNA聚合酶有五种: DNA 聚合酶【 )NA聚合酶 DNA聚合酶 DN IA聚合酶 DNA聚合酶 a (I) 3 (W) 丫 (M 5 (rn) ￡ (n) 细胞定位 细胞核 细胞核 线粒体 细胞核 细胞核 5/7 3/聚合作用 + + + + + 3/7 5 /外切酶 - - + + + 5/7 3/外切酶 - - - - - 功能 引物合成 修复 线粒体DNA合成 核 DNA合成 修复 DNA连接酶：催化双链 DNA连接酶：催化双链 DNA切口处形成磷酸二酯键, 提供能量，动物细胞和噬菌体的连接酶以 ATP提供能量 拓扑异构酶n：引入负超螺旋，使 DNA解旋 解螺旋酶：使 DNA双链中的氢键断开 单链结合蛋白(SSB：稳定DNA解开的单链 4、DNA的半不连续复制(semidiscontinuous replication 在体内，DNA的两条链都能作为模板，合成出两条新的互补链。 大肠杆菌的DNA连接酶以NAD + 由于 DNA分子的两条链是反向平 行的，而DNA聚合酶的合成方向是 5/7 3 /,所以DNA复制时，一条新生链连续合成，另一条新生链沿 5 ‘7 3 /不连续合成，这种方式称半不连续复制。 以复制叉向前移动的方向为标准，一条模板链是 3/7 5 /走向，其子代链沿 5/7 3 /连续合成， 称为前导链(leading strand );另一条模板链是 5/7 3 /走向，其子代链沿 5/73 /不连续合成，称为 滞后链(lagging strand )。DNA复制过程中形成的 DNA片段称冈崎片段(Okazaki fragment )。 5、 DNA复制的拓扑性质 拓扑异构酶控制着 DNA勺拓扑结构(DNA分子结构的空间关系)。拓扑异构酶分为两类： 拓扑异构 酶I能使DNA的—条链发生断裂和再连接，反应无需供能，主要集中在转录活性区，同转录有关；酶n能 使DNA的两条链同时发生断裂和在连接，反应需 ATP供能，分布在染色质骨架蛋白和核基质部位，同复制 有关。原核生物拓扑异构酶n可引入负超螺旋，消除复制叉前进时带来的扭曲张力，促进双链的解开；拓 扑异构酶I可减少负超螺旋。 6、 DNA复制体的结构 细菌和真核生物复制体的 真核生物 DNA 聚合酶a /DNA聚合酶5~ P CNA (增殖细胞核抗原) e ) RF-C 聚合酶a RnaseH1 和 MF-1(5 ‘7 3 / 外切酶) DNA聚合酶￡和DNA连接酶I T 抗原 拓扑异构酶n 组成复制酶进行性