网织红细胞计数教学内容.pdfVIP

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网织红细胞计数 1.项目名称 网织红细胞计数 2 .检验目的 2 .1 观察贫血疗效 2 .2 骨髓移植后监测骨髓造血恢复 2 .3 其他疾病协诊等 临床实验室 3.检验原理:网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞,其胞浆内尚存在有嗜碱性 的 RNA 物质,甲蓝活体染色后,其胞浆内尚存在有嗜碱性的 RNA 物质,经煌 焦油蓝或新亚呈浅蓝或深蓝色的网状结构。 4 .性能参数 4 .1 重复性 4 .2 分析和计算参数:百分比( %) 4 .3 样本量:染液量 =1 :1 4 .4 精密度 5.原始样品系统: 全血 6 .容器和添加剂类型 容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为 0.109M 乙二胺四乙酸钾 7.试及显微镜 7.1 10G/L 新亚甲蓝(或煌焦油蓝)生理盐水溶液: 新亚甲蓝 1.0G 枸橼酸钠 0.4G 氯化钠 0.85G 溶于双蒸馏水 100ML 中,混匀,过滤后备用。 7.2 显微镜 7.2 .1 商标 8.校准程序 :显微镜的验证,光路系统校正 灯泡大约半年更换一次 9.程序步骤: 9.1 标本采集与要求 9.1.1 标本采集: 抽取静脉血 1.8ml,加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝真空试管中,并轻轻 颠倒 10 次使之充分混匀,不得有凝块、不得形成泡沫, 总量不得超过 2.0±0.2ml , 并在试管上做好标识。 采血应避免溶血, 采血后 2 小时内送到检验科, 需要运输 时应在低温条件下运输。采集标本时宜“一针见血” ,以防止组织损伤。 9.1.2 不合格标本的处理 对凝固、有凝块、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本 ,距 采集时间超过 2 小时并且没有按要求储存的标本 ,按程序文件《样品核收、登记 和保存程序》处理 9.1.3 标本保存 检测应在标本采集后 2 小时内完成 ,2~8℃保存不超过 4 小时 ,分析后的标本保存 三天。 9.2 检验前准备 9.2 .1 把接收到的标本按顺序编写序号。 9.2 .2 准备清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管,玻璃笔。 9.3 病人标本的检验 9.3.1 取小试管 1 支加 10G/L 新亚甲蓝盐水溶液 2 滴。 9.3.2 加入末梢血(或 EDTA 钾抗凝静脉血) 2 滴于上述试管中,混匀。 9.3.3 室温下放置 10~15MIN 后,取 1 滴制成薄片。 9.3.4 油镜下至少计数 1000 个红细胞中网织红细胞数。 9.3.5 计算 网织红细胞百分数 =计数 1000 个红细胞中的网织红细胞数 /1000 网织红细胞绝对数(个 /L )=网织红细胞百分比数 * 红细胞数 /L 【注意】 1.活体染色时间不能过短。室温低时,放 37 摄氏度恒温箱。 2 .最好制两张片, 每张计数 1000 个红细胞, 避免分布不均引起的误差。 涂片要 薄而均匀,不使红细胞重叠。 3.为计数方便,可于目镜中放一中间有孔硬纸,缩小视野便于计数。 4 .试剂应定期重配,以免变质沉淀。 5.染液与血液比例约为 1:1,严重贫血时可适量增加血液的比例。 10.质量控制 10.1 显微镜法 网织红细胞目视激计数误差较大,影响因素主要有:操作人 对网织红细胞认识不同;血涂片的好坏;计数红细胞数量的多少和计数方法等。 10.2 仪器法 岁可计数红细胞 10000~50000个,但如存在 Howell-Joll

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