之二愈伤组织诱导、形成及分化.ppt

第四章（二） 愈伤组织的诱导形成及分化 ;第一节 愈伤组织的概念及类型 第一节 愈伤组织的诱导和形成 第三节 愈伤组织的继代及其生长分析 第四节 愈伤组织形态建成 第五节 愈伤组织的形成及其生理生化基础 掌握愈伤组织的概念和愈伤组织的诱导、形成及其特点以及愈伤组织的形态建成和调控 掌握愈伤组织形态建成及其调控 理解愈伤组织形成及形态建成的的生理生化基础 ;; ;植物体细胞培养产生完整植株示意图;A;植物细胞全能性是通过生命周期、细胞周期和组织培养周期来实现的。 图中A循环表示生命周期，包括孢子体和配子体的世代交替来实现细胞全能型。 B循环表示细胞周期，即细胞所决定的核质周期，由于核质相全能性；相互作用，DNA复制、转录mRNA并翻译为蛋白质，使循细胞全能性得以形成和保持； C循环是组织培养周期，表示组织和细胞与供体失去联系，在离体条件下，靠人工合成培养基中的养分，通过细胞脱分化、分裂、再分化来实现全能性。 ;?全能性的差异 表达全能性的前提： 生活细胞 分生状态或胚性细胞状态 胚性细胞 植物胚胎干细胞 成熟组织中的胚性细胞 ; 植物细胞的分类： 1.茎尖、根尖、形成层。 2.表皮细胞和薄壁细胞。 3.导管、筛管、管胞、纤维细胞。 ;二、植物细胞的分化 ★植物细胞分化：differentiation 导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 细胞分化是多细胞生物体形态发生的基础。 细胞分化在植物形态建成中是一个核心问题，没有细胞的分化就没有形态建成。 植物发育和细胞分裂、生长、分化有时间和空间上的必然联系。;二、植物细胞的脱分化 Dedifferentiation使已分化的细胞转变为原始无分化状态或分生细胞状态，形成胚性细胞团或愈伤组织的过程。 条件：创伤、激素 ;; 1、脱分化与细胞分裂的关系 两个观点 ?细胞分裂是脱分化的过程 ?细胞分裂是脱分化的结果; 2、脱分化过程中的生理活动与细胞结构 ?启动阶段：胞质增生，向中央伸出细胞质丝，液 泡蛋白体出现； ?演变阶段：细胞核向中央移动，质体演变成原质 体； ?终结阶段：恢复到分生细胞状态; 3、脱分化调控机理 ?细胞周期调控 细胞周期蛋白 cyclin（cycB 、 cycD） 周期蛋白依赖激酶 CDK（CDK-a CDK-b) 周期蛋白依赖激酶抑制子 CKI;外界因素对植物细胞分化的影响;?激素调控 添加生长素：菊苣 ; 添加细胞分裂素：大豆、萝卜; 添加生长素和细胞分裂素素：胡萝卜; 不添加激素：冠瘿组织、烟草肿瘤组织; 4、细胞分裂及结果 正常的二倍体细胞：第一次分裂为有丝分裂 高倍化细胞：第一次分裂多为无丝分裂; ;;表1 离体条件下IAA和蔗糖浓度对木质部和韧皮部分化的作用 ; 三、器官的分化 器官发生途径和体细胞胚发生途径 定义：离体培养下的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程。 ;★器官发生方式 先芽后根 先根后芽 愈伤组织途径;;★器官发生途径 1 经过愈伤组织的情况 外植体经诱导形成愈伤组织 “生长中心”形成 器官原基及器官形成 2 不经过愈伤组织 直接由原基发生 分生细胞团发生 ; ;为什么要进行愈伤组织培养;第一节 愈伤组织的概念及类型 一、定义 callus 在一定条件下从外植体的切口（伤口）部位生成的无特定结构和功能的薄壁细胞团。 二、愈伤组织的起始条件 创伤+激素 ★机械性创伤 ★微生物入侵 ★昆虫袭击 ; 三、来源 植物各种器官、组织、细胞均有产生愈伤组织的潜在可能性 ;; 四、类型 质地：脆软、坚硬（木质化） 颜色：白色、浅黄、浅绿、黄色、绿色、褐色、红色 表面：光滑、粗糙 ; ;类型; 五、愈伤组织培养的应用 ★种质保存 ★原生质体 ★悬浮培养 ★固定化细胞 ★植株再生 ★人工种子 ;第二节 愈伤组织的诱导、形成及特点 一、诱导培养条件 ★外植体 ★光照 暗 弱光 ★温度 20-30℃ ★培养基 N源 NH4+/NO3- C源 蔗糖 激素 生长素：2,4-D IAA NAA 0.01-10mg/L 细胞分裂素：KT ZT 6-BA 0. 1-10mg/L ;;**诱导期长短因植物种类、外植体的