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3730xl测序仪的原理 双脱氧链终止法测序原理 3730xl测序仪的构造 3730xl测序仪的特点 测序基本流程3730xl测序仪的应用文库类型及特点Sanger测序法的原理 1977年，英国人Fred Sanger 发现，如果在DNA复制过程中掺入ddNTP，就会产生一系列末端终止的DNA链，并能通过电泳按长度分辨。 不同末端终止DNA链的长度是由掺入到新合成链上随机位置的ddNTP决定的。 由此诞生了以Sanger命名的测序原理即双脱氧链终止法测序原理。核酸序列形成的基础3′,5′ -磷酸二酯键5′磷酸3′羟基核苷酸形成3?,5?-磷酸二酯键示意图“双脱氧末端终止”的含义TemplatePolymerasePrimerTerminatorGACT终止物标记方法dNTP因为颜色不同，4种终止物可以在一起进行反应。3730xl Sequence Map测序反应与PCR的比较 PCR测序反应 DNA 聚合酶Taq酶 测序酶 引物 一对 单向 底物dNTP dNTP+ddNTP* 模板 量少 质量要求高 产物