基因工程药物1.pptxVIP

基因工程药物;基因工程药物概论 ;一、基因工程药物种类;重组蛋白质类药物;核酸类药物;基因工程药物的特点;二、研制基因工程药物的关键技术;建立基因高效表达系统;;工程菌构建流程;;动物表达系统 优点：一是哺乳动物细胞能够表达人或哺乳动物的蛋白质；二是哺乳动物细胞可对表达的蛋白质进行正确折叠、组装和糖基化等加工,生产有生物活性的产品。 缺点：用转基因动物细胞生产药物成本昂贵。;　　转基因动物是指通过实验方法，人工地把外源基因导入动物的受精卵（或早期胚胎细胞），使外源基因与动物本身的基因组整合在一起，因而外源基因能随细胞的分裂而增殖，并能稳定地遗传给下一代的一类动物。　　　;1982年，R.D.Palmiter等科学家将金属硫蛋白基因的启动子和大白鼠生长激素基因拼接成融合基因，把这种基因导入小白鼠的受精卵，再将这一受精卵移植到一借腹怀孕的母鼠体内，生下来的小鼠比正常小鼠体格大一倍，称为“巨鼠”。;动物活体表达系统-乳腺生物反应器; 在经济效益方面，应用转基因动物—乳腺生物反应器技术来制造基因药物也是一种可以获取巨额经济利润的新型产业。 英国罗斯林研究所研制成功的转基因羊，其乳汁中含有抗胰蛋白酶，可治疗肺气肿病。这种病在北美比较常见，病人以前只能依赖于注射人的抗胰蛋白酶做替代疗法， 价格昂贵，而现在用转基因羊来生产，每升这种羊奶可售6000美元。; 如荷兰的GenPharm公司用转基因牛生产乳铁蛋白，预计每年从牛奶生产出来营养奶粉的销售额是50亿美元。;存在问题;动物活体表达系统-动物血液生物反应器;动物活体表达系统-动物膀胱生物反应器;植物表达系统;1、转基因植物—抗虫;1、转基因植物—抗病毒;1、转基因植物—其他抗逆;不会引起过敏的转基因大豆; 转基因抗乙肝西红柿(中国)，虽然不能治愈乙肝，但一年只吃几个抗乙肝西红柿，就完全能代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食品，就是将乙肝疫苗植入西红柿内，经过多代繁殖，使转入的基因稳定化。;基因工程药物的安全性及质量检控;采取的措施： 构建基因工程药物表达载体时给目的基因组装诱导型启动子，使其在诱导条件下才能有效表达。 构建基因工程药物表达载体时慎用选择标记基因或报告基因，避免生产的基因工程药物中残留对病人有害的物资。 尽可能采用外源DNA定位整合载体，避免外源DNA随机整合导致靶细胞基因突变。 根据基因工程药物生产和使用的具体情况，逐步完善对此类产品的严格质量控制。 ;基因工程药物的质量检控;;常用检测方法： 杂质和污染物 检 测 方 法 内毒素 鲎试剂、家兔热原法 宿主细胞蛋白 免疫分析、SDS、CE 其它蛋白杂质 免疫分析、SDS、 HPLC、CE 残余DNA DNA杂交、紫外光谱、蛋白结合 蛋白变异 肽谱、HPLC、 IEF、 CE 甲酰蛋氨酸 肽谱、HPLC、 IEF、 CE 蛋氨酸氧化 肽谱、HPLC、 质谱、氨基酸分析 产物变性或聚和脱氨基 SDS、IEF、HPLC、 CE、质谱、 凝胶过滤 ;杂质和污染物 检 测 方 法 单克隆抗体 SDS、免疫分析 氨基酸取代 氨基酸分析、肽谱、质 谱、CE 微生物 微生物学检查 支原体 微生物学检查 病毒 微生物学检查 ;基因工程药物应用现状及发展前景;基因工程药物专利 ;专利申请注意事项;专利的含义;授予专利权的条件：具备新颖性 、创造性和实用性。 专利申请前须考虑的问题： 1、经济效益的分析 2、专利前景分析 3、专利类型的分析与选择 4、不失时机地申请专利 5、申请国别的选择;专利权的保护范围、期限、终止和无效;3. 终止 （1）专利权期限届满自行终止 （2）专利权人以书面声明放弃其专利权 （3）专利权人不按时缴纳年费而终止 专利权终止后，其发明创造就成为公共财富，任何人都可利用 4. 无效 自授权日起满6个月内，任何单位或个人认为该专利权的授予不符合专利法规定的，都可以请求专利复审委员会宣告该专利无效。宣告无效的专利视为自始即不存在 ;基因工程蛋白质类药物;;细胞因子是指机体细胞合成和分泌的小分子多肽类因子，它们具有调节机体的生理功能和免疫功能，因而有可能利用基因工程技术进行生