基因工程的基本操作步骤课件.ppt

例题： 基因工程 是在 DNA 分子水平上进行设计施工的。 在基因操作的基本步骤中，不进行 碱基互补配对 的步 骤是 （ A. 人工合成目的基因 B. 目的基因与运载体结合 C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测和表达 一、基因工程与遗传育种 抗虫棉： 将苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因导入棉花细胞。 基因工程的优缺点 ①优点： 定向改造生物的遗传性状 ，克服远缘杂交不亲和 的生殖障碍。 ②缺点： 操作复杂，难度大 ，转基因生物和转基因食品存 在安全性问题。 二、基因工程与环境保护 用基因工程培育成功的 “超级细菌” 能分解 石油中的多种烃类 化合物 ，还能吞食转化汞和镉等重金属，分解 DDT 等毒害物质。 三、基因工程与疾病治疗 1g 胰岛素 /100kg 猪胰腺 1978 年 科学家将合成的 人胰岛素基因导入大肠杆菌 ，每 1000 L 培养液就能产生 100 g 胰岛素 ，使其价格降低了 30%-50% 。 例题： 下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是 （ ） A. 用 同种限制酶 切割载体与目的基因可获得 相同的黏性末 端 B. 以 蛋白质的氨基酸序列 为依据合成的目的基因与原基因 的碱基序列 相同 C. 检测到受体细胞含有 目的基因 就标志着基因工程操作的 成功 D. 用含 抗生素抗性基因 的质粒作为载体是因为其抗性基因 便于与外源基因连接 例题：（ 2012· 浙江） 天然的 玫瑰 没有蓝色花，这是由于缺 少控制 蓝色色素合成的基因 B ，而开 蓝色花的矮牵牛 中存 在序列已知的基因 B 。现用基因工程技术 培育蓝玫瑰 ，下 列操作正确的是（ A. 提取矮牵牛蓝色花的 mRNA ，经 逆转录 获得互补的 DNA ， 再 扩增 基因 B B. 利用 限制性核酸内切酶 从开蓝色花矮牵牛的 基因文库 中 获取基因 B C. 利用 DNA 聚合酶 将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞 D. 将基因 B 直接导入 大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 例题： 如图表示利用 农杆菌转化法获 得某种 转基因植物 的 部分操作步骤。以下说法 错误 的是（ A. 利用含有 四环素的培养基可 将含Ⅱ的细菌筛选出来 B. Ⅲ是 农杆菌 ，通过步骤③将目的基因导入植株 C. ⑥可与 多个核糖体 结合，并可以同时翻译出 多种蛋白质 D. ①过程的完成需要 限制酶和 DNA 连接酶 的参与 例题：（ 2015· 重庆） 下列有关 人胰岛素基因表达载体 的叙 述，正确的是（ ） A. 表达载体中的胰岛素基因可通过 人肝细胞 mRNA 反转录 获得 B. 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于 复制原 （起）点 C. 借助 抗生素抗性基因 可将含胰岛素基因的受体细胞筛选 出来 D. 启动子和终止密码子 均在胰岛素基因的转录中起作用 我们身边到底有哪些转基因食品？ 方形辣椒 黄金大米 彩色玉米 关于转基因：崔永元 PK 方舟子 崔永元观点： 反对转基因食品 方舟子观点： 支持转基因食品 基因工程的基本操作步骤 重点内容： ① 获得目的基因 。②目的基因与载体连接，形成 重 组 DNA 分子。③将重组 DNA 分子导入 受体细胞 。④ 筛选 含有目 的基因的受体细胞。⑤目的基因的 表达和鉴定 。 Step 1 ： 获得目的基因 苏云金芽孢杆菌： Bt 毒蛋白基因 目的基因： 人们感兴趣而需要的特 定基因，也叫 外源基因 。 目的基因的序列已知 模板、原料、酶、能量 ①用化学方法 人工合成 目的基因。②利用 PCR 技术扩增 目的基因。③ 逆转录法 。 利用 PCR 技术扩增 PCR 扩增仪 由美国科学家 Mullis 于 1985 年首创。 ① 模板的 双链 DNA 解旋 ，形成单 链 DNA 。 ② 引物 与单链 DNA 互补序列 配对结合 ③ Taq DNA 聚合酶 从引物起始， 进行互补链的合成 多次循环 ，获得大量双链 DNA 分子 PCR ：聚合酶链式反应 ①高温变性： 95 ℃。② 低温退火： 55 ℃。③ 适温延伸： 72 ℃。 目的基因的序列未知 方法：从基因文库中获取目的基因。 逆转录 基因文库： 将含有某种生物不同基因的 许多 DNA 片段 ，与 载体连接 后，导入 受体菌 的