九灭菌与无菌操作.pptx

第九章 灭菌法;一、物理灭菌法 （一）干热灭菌法 1、火焰灭菌法——火焰上加热20秒以上。 灼烧是最迅速、可靠、简便的灭菌方法，适用耐火焰材质的物品、金属制品（药刀）、玻璃器皿（玻璃棒）以及瓷器等用具的灭菌。;2、干热空气灭菌——在高温干热空气中灭菌的方法。 此法适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品等。粉针剂用无菌瓶的干燥就采用干热灭菌法。 缺点：穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡??、塑料及大部分药品。 ;（二）湿热灭菌法——是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以灭菌效率比干热灭菌法高。 特点：温度低，时间短，可靠，最常用。 蒸气性质：饱和蒸气>湿饱和蒸气、过热蒸气、不饱和蒸气 ;;（2）使用热压灭菌器注意事项 ①必须采用饱和蒸气，在灭菌前加入足量的水，以防产生过热蒸气； ②必须将灭菌器内的空气排尽； ③灭菌时间必须从全部内容物均已达到规定温度时开始计算；;④避免压力骤然下降或遇冷，防止容器炸裂；如：放气时不能过快；放完气后先将锅门打开10cm，使冷空气逐渐进入冷却，再逐渐开大；灭菌后喷淋冷却水快速降温也会有危险； ⑤压力表和温度表应灵敏、准确，两表数值应相互对应；不同海拔高度，不应使用同一表压； ⑥及时清扫异物，防止疏水器和排水管堵塞。 ;3、流通蒸气灭菌常压100℃流通蒸气，加热30-60min。 缺点：不能保证杀灭所有的芽胞。 适用情况：消毒及不耐高热的制剂的灭菌。 4、煮沸灭菌法：100℃沸水，加热30-60min。本法灭菌效果差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时加入适当的抑菌剂，可杀死芽胞细菌。;5、低温间歇灭菌法 80℃加热1小时→20-25℃保持24小时（让芽胞变为增殖体）→再加热，放置，反复三次，直至消灭芽胞为止。 本法适用于不耐高温的制剂的灭菌。;（三）紫外线灭菌法——254nm灭菌力最强（200-300nm） 适用于：室内空气或表面灭菌。 注：紫外线对人体照射过久，能产生结合膜炎、红斑及皮肤灼伤等。所以应对工作者的皮肤及眼睛作适当防护。 ;（四）滤过除菌法：用滤过的方法除去活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌的方法。 除菌滤过器：微孔滤膜0.22-0.45μm（0.22，0.3） 适用于：不耐热药液（如：生物制品，抗生素等）、气体、水等的灭菌。;（五）辐射灭菌 γ射线（60Co）——不升温，穿透性强，特别适于已经包装好的产品。缺点：设备费用高，对某些药品可能产生药效降低、产生毒性物质或发热物质，同时还要注意安全防护。 中药材以及中成药中的应用。 （六）微波灭菌，高速热风灭菌 ;二、化学灭菌法 （一）气体灭菌法 1、环氧乙烷 机理：为烷化剂，与菌体蛋白质中的-COOH，-NH2，-SH，-OH基结合，使之产生不可逆性破坏。 适用于：一次性注射器、输液器、注射针头、敷料，对热敏感固体药物等。 2、臭氧：空间清毒，原水消毒。 3、甲醛、丙二醇、乳酸熏蒸——室内空间的灭菌。 ;（二）化学杀菌剂——物体表面灭菌。 1、0.1%-0.2%新洁尔灭 2、2%苯酚或甲酚皂溶液 3、75%乙醇 4、2%碱性戊二醛 ;三、无菌操作法：整个制备过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。;无菌检查：参照《中国药典》，对所有注射剂均要做此项目 方法： 1、直接接种法：取一定量供试品，以无菌操作将该供试品分别接种于需气菌、厌气菌培养基培养数日，在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。 2、薄膜滤过接种法：将药液用0.45μm的微孔滤膜过滤器过滤，然后加入需气菌、厌气菌培养基培养数日，在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。 ;;;;;;;;;（2）使用热压灭菌器注意事项 ①必须采用饱和蒸气，在灭菌前加入足量的水，以防产生过热蒸气； ②必须将灭菌器内的空气排尽； ③灭菌时间必须从全部内容物均已达到规定温度时开始计算；;④避免压力骤然下降或遇冷，防止容器炸裂；如：放气时不能过快；放完气后先将锅门打开10cm，使冷空气逐渐进入冷却，再逐渐开大；灭菌后喷淋冷却水快速降温也会有危险； ⑤压力表和温度表应灵敏、准确，两表数值应相互对应；不同海拔高度，不应使用同一表压； ⑥及时清扫异物，防止疏水器和排水管堵塞。 ;3、流通蒸气灭菌常压100℃流通蒸气，加热30-60min。 缺点：不能保证杀灭所有的芽胞。 适用情况：消毒及不耐高热的制剂的灭菌。 4、煮沸灭菌法：100℃沸水，加热30-60min。本法灭菌效果差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时加入适当的抑菌剂，可杀死芽胞细菌。;5、低温间歇灭菌法 80℃加热1小时→20-25℃保持24小时（让芽胞变为增殖体）→再加热，放置，反复三次