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分 子 生 物 学南京农业大学 生命科学学院第三章 生物信息的传递(上)——从DNA到RNA 本章将介绍生物信息的传递的上半部分,即转录——从DNA到RNA。南京农业大学 生命科学学院第三章 生物信息的传递(上)基因作为唯一能够自主复制、永久存在的单位,其生理学功能以蛋白质形式得到表达。DNA序列是遗传信息的贮存者,它通过自主复制得到永存,并通过转录生成mRNA,翻译生成蛋白质的过程控制所有生命现象。南京农业大学 生命科学学院第三章 生物信息的传递(上)转录(transcription)——生物体以DNA为模板合成RNA的过程。转录后得到的RNA要经过加工才能变成成熟的mRNA转录产物还可以变为rRNA和tRNA。参 与 转 录 的 物 质:底物 : 4种NTP ( ATP, UTP, GTP, CTP ) 模板 : DNA 酶: RNA聚合酶其他蛋白质因子南京农业大学 生命科学学院第三章 生物信息的传递(上)第一节 转录的基本过程第二节 转录机器的组成第三节 启动子与转录起始第四节 原核与真核生物 mRNA的特征比较第五节 终止与抗终止第六节 mRNA的加工南京农业大学 生命科学学院第一节 转录的基本过程无论在原核还是真核细胞中,RNA链的合成都具有以下几个特点:RNA按5’→3’方向合成以DNA双链中的反义链为模板不需要引物参与合成的RNA有与DNA编码链相同的序列(A-U)转录的基本过程包括:模板的识别,转录起始,转录延伸,转录终止南京农业大学 生命科学学院第一节 转录的基本过程1. 模板的识别模板的识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。启动子是基因转录起始所必需的一段DNA序列,是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。真核细胞中的模板识别与原核细胞有所不同,需要一些转录调控因子(辅助蛋白),RNA聚合酶才能识别启动子并形成转录前起始复合物(PIC)。南京农业大学 生命科学学院2. 转录起始RNA聚合酶结合到启动子上以后,使启动子附近的DNA解旋并解链,形成转录泡以促使核糖核苷酸与模板DNA配对。转录起始即是RNA链上第一个核苷酸链的产生。无需引物。起始后直到形成9个核苷酸的过程是通过启动子阶段,此时RNA聚合酶一直在启动子处,之后进入正常延伸。南京农业大学 生命科学学院3. 转录延伸转录延伸即是RNA聚合酶释放σ因子离开启动子后,核心酶沿着模板DNA移动并使新生RNA链不断伸长的过程。4. 转录终止当RNA链延伸到终止位点时,RNA将停止合成,转录泡瓦解,DNA链复原,新生RNA链和RNA聚合酶将被释放下来。这即是转录终止。南京农业大学 生命科学学院第二节 转录机器的组成转录机器即是转录复合物,其最核心成分是RNA聚合酶。南京农业大学 生命科学学院第二节 转录机器的组成1. RNA聚合酶RNA聚合酶是转录过程中最关键的酶。原核和真核生物的RNA聚合酶虽然都能催化RNA的合成,但在其分子组成、种类和生物化学特性上各有特色。南京农业大学 生命科学学院第二节 转录机器的组成1. RNA聚合酶原核生物RNA聚合酶在细菌中,一种RNA聚合酶几乎负责所有mRNA、rRNA和tRNA的合成。大肠杆菌RNA聚合酶:2个α亚基1个β亚基1个β’亚基1个σ亚基核心酶全酶南京农业大学 生命科学学院原核生物RNA聚合酶转录的其实过程需要全酶,延伸过程仅需要核心酶。各亚基的功能:β亚基和β’亚基组成了聚合酶的催化中心,它们在序列上与真核生物RNA聚合酶的两个大亚基同源。 β亚基能与模板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。α亚基可能与核心酶的组装及启动子的识别有关,并参与RNA聚合酶和部分调节因子的相互作用。南京农业大学 生命科学学院各亚基的功能:σ因子的作用是负责模板链的选择与转录的起始,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别启动子。提高酶对启动子的亲和力,酶底结合常数提高103倍降低酶对非专一性位点的亲和力,非特异性结合常数降低104倍某些细菌内含有能识别不同启动子的σ因子。南京农业大学 生命科学学院?第二节 转录机器的组成1. RNA聚合酶真核生物RNA聚合酶在真核生物中共有3类RNA聚合酶。真核生物RNA聚合酶一般由8-16个亚基所组成,相对分子质量超过5×105 。酶位置转录产物相对活性对α-鹅膏蕈的敏感性RNA聚合酶Ⅰ核仁28s,18s,5.8s rRNAs50~70%不敏感RNA聚合酶Ⅱ核质hnRNA,mRNA,某些SnRNAs20~40%高度敏感RNA聚合酶Ⅲ核质tRNA,5SrRNA,某些SnRNAs~10%存在物种特异性?南京农业大学 生命科学学院?第二节 转录机器的组成1. RNA聚合酶其它RNA聚合酶除了前述两种RNA聚合酶,还有:T3和
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