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02真核微生物
什么是真病毒、亚病毒、类病毒、拟病毒和朊病毒?**
病毒粒有哪几种对称形式?每种对称又有几类特殊外形?试各举一例。**
什么是包涵体、空斑、枯斑和噬菌斑?它们各有何实践意义?*
试以烟草花叶病毒为代表,图示并简述螺旋对称的杆状病毒的典型构造。*
试以腺病毒为例,图示并简述二十面体对称的球状病毒的典型构造。*
试以E.coli T偶数噬菌体为例,图示并简述复合对称病毒的典型构造,并指 出其各部分的 特点和功能。*
什么叫烈性噬菌体?简述其裂解性生活史。**
什么是效价?其测定方法有几?**
试简述测定噬菌体效价的双层平板法。
什么是一步生长曲线?它可分几期?各期有何特点?**
试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。*
试列表比较动、植物病毒与T偶数噬菌体在增殖过程中的不同点。
参考答案:
真病毒:由核酸和/或蛋白质等成分组成的超显微非细胞生物。
亚病毒:仅由核酸或蛋白两种组分中的一种组成的病毒,包括类病毒(Viroids)、卫星病毒(Satellite virus)、卫星核酸、缺陷干扰颗粒、朊病毒。
类病毒:是一类只含RNA,专性寄生在活细胞内的分子病原体。
拟病毒:类类病毒或者壳内类病毒,一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。
朊病毒:又称普利昂,或者蛋白侵染子,是一类不含核酸的传染性蛋白质分子,能够引起宿主体内现成的同类蛋白质分子(PrPc)发生与其类似的感应性构想变化。
包涵体:宿主细胞核内或者细胞质中毒粒或者亚单位聚集的结果,也有可能包含有细胞成分,如核糖体或者染色质。他们都会破坏细胞结构。
空斑:由动物病毒在宿主单层细胞培养物上形成。
枯斑:由植物病毒在植物叶片上形成的枯斑。
噬菌斑:噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”。
空斑、枯斑和噬菌斑这类“群体形态”有助于对病毒的分离、纯化、鉴别和计数等许多实际工作。
TMV外形呈直杆状,长300nm,宽15nm,中空(内径4nm)。由95%衣壳蛋白和5%单链RNA(ssRNA)组成。衣壳含2130个皮鞋状的蛋白亚基即衣壳粒,每个亚基含158个氨基酸,相对分子质量为17500.(这里的亚基叫衣壳粒,其实在这里用原体更加贴切)亚基以逆时针方向做螺旋状排列,共围绕130圈。
规则的多面体,具有20个等边三角形和12个顶点,42个壳粒。衣壳粒(capsomer)①五邻体 –含五个亚基,位于12个顶点上②六邻体 –含六个亚基,构成棱和面。每个亚基叫做原体。
双对称Binal symmetry头端:二十面体, 双链DNA 170kbp;颈部;尾端:螺旋状,由5部分组成:尾鞘、尾管、基板、刺突、尾丝。
烈性噬菌体:在短时间内能够完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五个过程而实现其繁殖的噬菌体叫做烈性噬菌体。
裂解性生活史:
吸附 侵入 增殖 成熟 裂解
效价:每毫升病毒悬液的感染单位数量。
测定方法:
①形成噬菌斑单位数(感染中心数);
②双层平板法。
双层平板法:预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿浇上一层平板,待凝固后,再把预先融化并冷却到45°以下,加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基,在试管中摇匀后,立即倒在底层培养基上铺平待凝,然后在37°下保温。一般经过10余小时后即可对噬菌体进行计数。
一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体生长规律的试验曲线。
分为三个大期即潜伏期、裂解期(上升期)和平稳期。而潜伏期又可分为隐晦期(隐蔽期)和胞内累积期。
潜伏期之隐晦期:宿主不含有任何完整的具有侵染性的毒粒,此时正在进行噬菌体核酸复制和蛋白质衣壳的合成;
潜伏期之胞内累积期:有侵染性的毒粒增加,但是不裂解出胞。
裂解期:游离毒粒变多。
平稳期:感染后的宿主细胞已经完全裂解,效价达到最高值。
溶源性:温和噬菌体侵入并不引起宿主细胞裂解,而是将基因组整合到宿主基因组上,随宿主基因的复制而复制。
溶源菌:被温和噬菌体侵染而不裂解的宿主。
温和噬菌体:引起溶源性的噬菌体。
比较项目
动物病毒
植物病毒
T偶噬菌体
生活史
吸附→侵入→生物合成→装配成熟与组装
被动侵入→脱壳→生物合成→组装→出胞
吸附→侵入→增殖→成熟→裂解
图示生活周期
——
增殖过程
dsDNA复制周期:
(1)病毒与细胞结合;
(2)病毒进入细胞,去包膜;
(3)脱壳;
(4)病毒DNA进入细胞核;
(5)病毒基因组复制,合成子代病毒及病毒mRNA;
(6)以病毒基因转录的mRNA进入细胞质;
(7)病毒mRNA翻译病毒子代蛋白,包括早期蛋白和晚期蛋白;
(8)装配子代病毒;
(9)出核,同时披上包膜;
(10)释放到胞外
丝状,
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