动物实验的基本技术和方法.pptxVIP

动物实验的基本技术和方法;进行实验操作前必须注意的事;国际上对动物实验伦理有如下五项要求: ⑴动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育管理,不使动物陷入饥饿、缺水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶在必须使用犬、猫和猴时，在实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。 ⑸要爱护动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。 ;2. 动物实验技术和方法是实践性非常强的，不能仅靠书本理论知识，需要通过反复实践加以掌握。 目的： 保证实验的顺利进行。 减少动物承受的痛苦。;动物实验前的准备;5.预实验 正式实验前的演习 预实验可用少量动物进行 预实验结果不能并入正式实验结果一起分析。;一、动物的抓取;4. 兔抓取的注意点 最好戴人???革围裙和袖套，以免爪子抓伤。 采用正确地抓取方法。 可采用兔固定器固定进行实验操作，或一人抓取固定，一人实验操作。;5. 犬抓取注意点 实验用犬有专用的比格犬和农村收购来的草犬。 犬是通人性的，草犬购入后，饲养人员和实验人员要经常亲近它们，使它放松对你的警惕，容易直接抓取它们。 不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤害会使它对你更加恐惧，影响以后实验的进行。 抓取后用绳子将嘴绑住。;二、动物编号常用的标记方法;;2. 剪耳（打孔）法：啮齿类小动物 3. 号码钳法：适用于兔、犬等大动物 4. 耳牌法：适用于羊、牛等大家畜 5. 电子芯片植入法：;三、动物被毛的去除方法;常用脱毛剂配方 配方1：硫化钠8g溶于100mL水中。 配方2：硫化钠：肥皂粉：淀粉的比例为3：1：7，再加水调成糊状。 配方3：硫化钠10g和生石灰15g溶于100mL水中。 配方1和2适用于家兔和啮齿类动物的脱毛，配方3适合给犬脱毛。 脱毛后用清水将脱毛区清洗干净。 ;四、实验动物的麻醉方法;全身麻醉简称全麻，全麻是指麻醉药通过呼吸道吸入、静脉和肌肉注射等途径，进入实验动物体内，使其产生短时间意识丧失、痛觉消失、肌肉松弛和反射抑制等中枢神经系统抑制现象。当麻醉药从体内排出或在体内代谢破坏后，实验动物逐渐清醒，不留后遗症。 全麻有吸入麻醉法和注射麻醉法两种途径，吸入麻醉法用挥发性麻醉药，注射麻醉法用非挥发性麻醉药。 ;（1）吸入麻醉法 常用药物为乙醚等。吸入麻醉法有开放吸入和气管内插管吸入两种方法。动物实验大都采用开放吸入法 开放吸入：适用于啮齿类小动物，可用乙醚、氯仿 小动物吸入麻醉机国外已研制成功。 气管内插管：适用于犬、猴、羊等大动物，乙醚是最常用的麻醉药。 吸入麻醉的优点： 麻醉平稳、安全可靠、 停止吸入后很快苏醒 缺点： 需要一定的仪器设备，;吸入乙醚全麻的分期 第一期：镇痛期 指麻醉给药开始到实验动物意识完全丧失的时期。此期实验动物各种反射存在，肌张力正常，血压升高，心跳加快。 第二期：兴奋期 指实验动物从意识和感觉消失到外科麻醉期开始的时期。实验动物挣扎、屏气、瞳孔开大、眼球快速转动、血压明显升高、心跳明显加快、呼吸不规则、各种反射亢进。此期应频频取开面罩，让实验动物多次呼吸新鲜空气。 第三期：外科麻醉期 指实验动物由兴奋状态转入抑制状态的时期。实验动物的呼吸由不规则状态变为规则状态，血压和心率平稳、肌肉松弛、反射活动下降，此期是实验操作的最佳时期。 第四期：麻醉中毒期 指麻醉过深导致实验动物处于垂危状态的时期。此期出现的时间不定，主要表现为心跳和呼吸微弱、不规则甚至停止，血压急剧下降甚至测不到。如果抢救不及时会导致死亡。;（2）注射麻醉法 注射麻醉法是使用非挥发性麻醉药进行全麻的方法。在动物实验中比较常用。 常用麻醉药： 戊巴比妥钠 硫喷妥钠 氯氨酮 乌拉坦 大动物：静脉注射或腹腔注射 啮齿类动物：腹腔注射;实验动物麻醉应注意的事项 麻醉之前应禁食。 麻醉之前应准确称量动物体重，作为计算麻醉剂用量的依据。 应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的，如戊巴比妥钠、硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力，使肌肉松弛，而氯胺酮则相反。 大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿托品和苯巴比妥钠。 静脉注射麻醉药是必须缓慢，边注射边观察动物的意识、角膜反射、肌肉紧张性和对疼痛的反应，达到麻醉要求时应停止注射。;6.大动物手术时应配备麻醉师，在麻醉过程中密切观察动物的反应，如血压、脉搏、呼吸和体温，及时调节麻醉药剂量，保证手术顺利进行。 7.动物在麻醉期间、手术后至苏醒期体温会下降，应注意手术室的室温