生物学特点培养细胞的细胞生物学.pptxVIP

生物学特点;体外培养物的细胞生物学特点;体外培养物的细胞生物学特点 ; 1.培养的细胞之间 仍有在形态和机能上的相互依存关系。 在结构上，如： 上皮细胞仍见有桥粒 在生理活动上， 单个细胞虽能生长繁殖,  但不如群体细胞能力强， 当相邻细胞接触，便导致运动停止 细胞相互沟通生物信息的结果 2.培养的细胞和基质之间 对细胞外基质仍有依存性 ; 但有不同 人工所模拟的条件与体内实际情况 仍不完全 相同  当细胞被置于体外培养后 久了,必然发生变化与体内主要不同 相对孤立、相对单一 缺乏体内的一些影响 ; 主要表现 失去原有组织结构和细胞形态 如：肌肉细胞—纤维化 分化减弱或不显 出现类似“返祖”现象：细胞趋向单一化  或获得不死性 或变成具有恶性性状的细胞群 因此要正确认识体外培养细胞 是一种特定条件下生长的细胞群体;培养细胞的主要的生物学特点;去分化;体外培养物的细胞生物学特点 ;培养细胞分化状态的变化 ;去分化(脱分化):各种分化细胞，逐渐失去各自的形态与功能“个性”，表现出某种趋同性 如: 培养的成纤维细胞  在适当刺激下，可分化为 其它结缔组织细胞和肌组织细胞， 表现出类似未分化的间充质细胞的特性，‘返祖’ 有2点 ;1.但,去分化并不意味着完全返回胚胎时期的原始细胞状态如:高度分化的神经细胞和心肌细胞 已经丧失的增生活性不可能恢复 但已经具备的生物电活动特性 不会完全失去 ;2. 可重新表现出分化特点 如：把表皮细胞放在气液界面上培养，可分化成 含大量角蛋白丝的角质细胞 内皮细胞--但，这种能力会随着培养时间延长  逐渐丧失总之，休外培养,使细胞 结构与功能上的“可塑性”增大  防止去???化;贴附和铺展;贴附(粘附)和附着 ; 不同细胞的粘附能力不同 如巨噬细胞、成纤维细胞等粘附能力强 能在数分钟至数十分钟内粘附到固相表面 如神经元细胞、羊水细胞，粘附能力弱 需要数小时乃至更长的时间才能粘附到固相表面 粘附能力强的细胞--- 粘附能力弱的细胞--- 可利用此特点（粘附：快、牢；慢、弱） 分离、纯化细胞 ;细胞形态因是否贴附于底物而不同悬浮的细胞: 基本圆形粘附和贴壁的细胞: 扁平圆形 相差显微镜 “亮圈” 很快过渡--;贴附过程 ：3步 贴附因子粘附 细胞开始附着 细胞进一步牢固附着—伸展 ;影响因素 各种细胞不同 如接种30’后…第二瓶30’… (附着最强)巨噬细胞一成纤维细胞 ——上皮细胞——血细胞(最弱) 生物因素 血清、培养液中的促附着因子 机械，物理等其他因素因素 离心：促进附着 流动：培养液流动可阻止细胞附着 低温：可抑制附着 ;措施（因素） 1.包被对分化程度高、生长能力差的细胞 可在培养瓶皿表面包被有利于细胞粘附和 生长的生物活性物质 如:-- 通过其所带电荷先吸附--, 培养的细胞再与其结合。 血清内含有多种能够 促进细胞粘附的成分 细胞本身也可能产生一些粘附分子 ;措施 2.减少接种时细胞悬液的量待细胞粘附和贴壁之后，再补充足够的培养液 3.减少培养液中血清的含量 使培养液黏度降低 4.培养液中离子成分及其浓度 如，培养液中的Ca含量过低时不利于 细胞的粘附、贴壁和铺展 5.培养液的温度 低温会减低细胞的活动，妨碍黏附和贴壁 ;促进细胞粘附的成分;;铺展 ;铺展状况 是调节细胞形状的主要方面 铺展得越好，细胞越扁 意味着细胞与生长基质表面接触面越大 铺展状况 与细胞的生长有密切关系 只有当细胞铺展到合适的程度 DNA合成才开始进行