生物工艺学实验.pptxVIP

实验一 小型发酵罐的演示一、目的 1、了解发酵罐的基本结构组成。 2、掌握发酵罐的操作规程及使用注意事项。二、发酵罐原理及结构： 1、原理：发酵罐是进行液体发酵的特殊设备。生产上使用的发酵罐容积大，均用钢板或不锈钢板制成；实验室使用的小型发酵罐，容积从1L至数百升，罐体由耐压玻璃或不锈钢板制成，配备有无菌空气制备系统、蒸汽制备系统、控制器和各种电极，可以自动地调控实验所需的培养条件，是微生物学、生物工程、医药工业等科学研究所必须的设备。2、?发酵罐的结构： 按照发酵罐的设备：分为机械搅拌通风发酵罐和非机械搅拌通风发酵罐。按照微生物的生长代谢需要,分为好气型发酵罐和厌气型发酵罐。 罐体：主要用来各种菌体的培养和发酵，密封性要好（防止菌体被污染）。 罐体当中有搅拌浆，用于发酵过程当中不停的搅拌；底部通气的Sparger，用来通入菌体生长所需要的空气或氧气。罐体的顶盘上有控制传感器，最常用的有pH电极和DO电极，用来监测发酵过程中发酵液pH和DO的变化控制器，用来显示和控制发酵条件等。三 主要内容1.各部件名称及功能2.电极及电极标定3.发酵罐的灭菌4.发酵5.注意事项1.各部件名称及功能发酵罐由罐体、管路、主机及附属设备四部分组成2）管路蒸汽一路蒸汽进发酵罐夹套二路蒸汽进发酵罐三路蒸汽进取样管路空气：进罐水一路进发酵罐夹套；电加热器、循环水泵、电磁阀二路进排气管夹套排气管排水管4）附属设备蒸汽发生器空气压缩机2.电极及电极标定pH电极、溶氧电极、泡沫电极、温度电极pH电极、溶氧电极使用时需标定1.pH电极和溶氧电极在标定之前要在缓冲液中浸泡并联机通电30min以上。2.pH电极先标定零点（6.86），再标定斜率（4.00）。3.在灭菌达到100℃时标定溶氧0%，（也可在饱和的亚硫酸钠溶液中标定0%）发酵参数设置完毕但还未接种时标定100%。3 发酵罐的实罐灭菌1）准备开蒸汽发生器、开空气压缩机、开水源开关、标定电极、装罐。2）预热（0-90℃）开搅拌器，转速为200-300rpm；温度设为手动微开排气阀、开排夹套水阀，三通阀提到上挡位，其它阀均关，缓慢开一路蒸汽阀，蒸汽进夹套预热3）加热（蒸汽进罐）90-121℃停搅拌，开空气过滤器排冷凝水阀，开二路蒸汽阀，至基本无冷凝水排出，关小排冷凝水阀，三通阀放到下挡位，蒸汽进罐（调整过滤器前压力表示数在0.12-0.16MPa之间）到100℃约2min后关闭排气阀此时可标定溶氧为0%4）保温阶段（121℃，20min）开排气阀，旋松接种口，开三路蒸汽阀—开取样阀—开罐底阀，6-7min后关闭，关闭顺序相反调节进气量和排气量，使温度维持在121℃5）降温（121 ℃-发酵温度）关接种口，三通阀提至上挡位，关二路蒸汽阀，关一路蒸汽阀，尾气关小开空气过滤器排冷凝水阀，开空气阀，至无冷凝水排出时关闭排冷凝水阀，三通阀放至下档位。空气进罐点注水开关，关闭排夹套水阀，开启进水阀和循环管线切断阀，调温度为自动。温度低于100℃时开搅拌冷却过程中，罐压严禁掉零。4.发酵1）温度降至发酵温度后，设置各发酵参数，溶氧电极校100%2）火焰圈接种（罐压调小后再接种）3）. 接种后即可通气培养，罐压保持在0.05Mpa。4）发酵初始化5）发酵结束，数据存盘6）放料，清洗，关仪器。注意事项 4.1 在消毒过滤器时，流经空气过滤器的蒸汽压力不得超过0.17MPa，否则过滤器滤芯会被损坏，失去过滤能力。4.2 在发酵过程中，应确保罐压不超过0.17MPa。4.3 在实消过程中，夹套通蒸汽预热时，必须控制进汽压力在设备的工作压力范围内（不应超过0.2MPa），否则会引起发酵罐的损坏。 4.4 在空消、实消结束后冷却过程中，严禁发酵罐内产生负压，以免造成污染，甚至损坏设备。4.5 在发酵过程中，罐压应维持在0.03～0.05MPa之间，以免引起污染。 4.6 在各操作过程中，必须保持空气管道中的压力大于发酵罐的罐压，否则会引起发酵罐中的液体倒流进入过滤器中，堵塞过滤器滤芯或使过滤器失效。思考题：1 实罐灭菌及注意事项2 电极的标定3 如何控制发酵过程中温度、溶氧、pH的变化 4 分析发酵过程中发酵热组成及温度、pH对发酵的影响5 常用的发酵方式及其区别。（生物反应动力学第二节） 实验二 乳酸细菌的培养与酸牛奶的制作一、实验目的1、掌握乳酸发酵的基本方法。2、了解酸奶发酵的本质，掌握酸奶制作工艺。二、实验原理某类微生物在厌气条件下，利用 糖并在发酵液中积累乳酸的作用，称为乳酸发酵。它主要是乳酸细菌。常见的乳酸细菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。它们生成的乳酸，能抑制一些腐败细菌的活动。日常生活中利用乳酸发酵制泡菜、制造酸奶等。以牛乳为原料， 通过乳酸菌（保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌）的作用分解乳糖产酸，乳酸使牛奶中酪蛋白(约占全乳