基因的功能验证陈璟.pptxVIP

20世纪人类科技史上的三大创举;; 一是通过增强其表达，取得表达产物进行研究， 增强其表达因为不能反映基因产物的真实表达情况，而逐渐被抛弃 基因的异源表达，在近缘物种类表达目的基因。 二是减弱或者终止其表达，观察整体功能的变化，进而推测相应的基因功能 ;;鉴定新的蛋白与蛋白相互作用 鉴定蛋白级联底物 鉴定突变对蛋白与蛋白结合的影响 在已知的相互作用中鉴定干扰蛋白质 (反向双杂交系统);利用酵母作为真核蛋白相互作用的模型;第一相电泳根据蛋白质的不同等电点分离各种蛋白质，即等电聚焦法(isoelectrie focusing IEF) 第二向电泳根据蛋白质的不同分子量进一步分离等电点相同的蛋白质，即SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS);双向凝胶电泳技术是目前蛋白质组研究的主要技术之一, 双向电泳根据等电点和分子量可一次性分离数千种蛋白质，经染色后蛋白质再PAGE上可形成密度不同、分布不均的复杂点图谱。 如何有效的对双向凝胶电泳图像分析，如何对图谱上的蛋白质点进行检测、定量、比较、分析和归类，挖掘有价值的蛋白质点的信息是双向电泳分析软件所要解决的问题。;;蛋白质的分离与鉴定;质谱基础;组织切片或印片原位质谱分析技术 两级飞行时间串联质谱（MALDI-TOF/TOF） 傅里叶转换回旋共振质谱（FTMS） 表面增强激光解吸/电离