绿色荧光蛋白(GFP)技术在细胞生物学研究中的应用.pptVIP

绿色荧光蛋白(GFP )技术在细胞生物学研究中的应用 ;荧光现象在许多海洋无脊椎动物中普遍存在着。许多刺胞亚门的动物和几乎所有栉水母类的动物在受到刺激时都可以发出荧光：刺胞亚门的动物多发射绿色荧光，而栉水母类发射蓝色荧光。绿色萤光蛋白(green fluorescent protein)，简称GFP，它的发现和应用被称为细胞生物学上的一次革命。这种蛋白质结构很特殊，在受到蓝光或紫外线刺激时可以发射绿色荧光，并不需要任何协同因子、底物，适合用作普遍的报告标记，尤其适合于活体细胞或组织。由于GFP稳定、灵敏度高、无生物毒性、荧光反应不需要任何外源反应底物及表达无物种或细胞组织的专一性, 检测简单， 结果真实可靠，是一种独特的报告蛋白(Reporter protein) 。可广泛用于基因的表达与调控、蛋白质的定位、转移及相互作用、信号传递、转染与转化, 以及细胞的分离与纯化等研究领域。 ;图1 绿色荧光蛋白 ;1962年Shimomura和Johnson等人[1]首先从一种水母类动物Aequorea Victoria中分离纯化出了GFP, 1992年Prasher[2]等克隆了GFP基因的cDNA并分析了GFP的一级结构,1994年M.Chalfie[3]等最早用重组野生GFP型基因做报告基因, 成功地在原核和真核生物中得到表达。90年代后, 人们对GFP的性质和应用进行了不断深入的研