第八章 第一节鱼类学.pdf

第八章核移植技术与动物克隆 本章主要内容 第一节 细胞核移植的研究简史 第二节 鱼类的细胞核移植技术 第三节 细胞核移植技术在鱼类育种中的应用 第一节 细胞核移植的研究简史 一、细胞核移植的概念 细胞核移植 （nuclear transplantation ）：应用显微操作技术， 将一种动物细胞的细胞核，移入到同种或异种动物的去核成熟 卵内，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育成动物个体 （核质杂种）。 核质杂种 （nucleo-cytoplasmic hybrid）  根据核供体来源的不同，细胞核移植可分为： 1. 胚胎细胞核移植：核供体细胞 来自多细胞阶段的胚胎； 2. 体细胞核移植：核供体细胞来 自动物体细胞。  说明动物的已经高度分化的体细胞， 是可以进行重新编程的 二、细胞核移植的研究历史 1、细胞核移植技术的提出  1885年，Freiburg大学动物学教授Weismann提出，为什么 起源于同一个受精卵的细胞会变成各种各样的特化状态？  Weismann猜测，可能是受精卵分裂后，每个子细胞只继承 了母细胞一部分的遗传信息。  不久之后，胚胎学家Roux宣布，他用 “半胚”实验证实 了Weismann 的猜想。  但是，Driesch很快就推翻了Roux 的实验结论，他发现， 2-细胞期海胆胚胎的两个卵裂球各自可发育成一个完整的 个体。这个结果为后来的细胞核移植奠定了遗传学基础。  1902年，德国胚胎学家Spemann证实，2-细胞期蝾螈胚胎 的两个卵裂球能分别发育成两个完整的蝾螈个体。 蝾螈受精卵 Hans Spemann （德国） 胚胎早期，各个细胞核在生长、发育功能上极为相近 (1869-1941)  但是，在胚胎发育的后期，却很难得到完整个体。  因此提出，一个胚胎的细胞是在某一个时间点之后才开 始分化的。 2、细胞核移植技术的创立和发展  1952年，美国实验胚胎学家Briggs和King沿用Spemann的思 路和实验技术，将美洲豹蛙已发育胚胎细胞核移植到未受 精卵细胞中，首次成功获得两栖动物胚胎细胞核移植后代。 该实验开创了脊椎动物细胞核移植的先河。 Robert Briggs Thomas King (1911-1983) (1921-2000)  1958年到1962年，英国剑桥大学的John Gurdon和Machineer利 用爪蟾原肠期内胚层细胞核移植，培育出可育的非洲爪蟾。 并指出，原肠胚的胚胎细胞依然没有发生分化，可以进行核 移植并发育为成体。  1970年John Gurdon 以同样 的方法，用青蛙脚蹼角质 化细胞进行移核试验，蛙 卵发育成了蝌蚪。  从1961年开始，我国著名生物学家童第周，为研究细胞核 和细胞质对胚胎发育的影响。  把鲤囊胚细胞核移入鲫鱼去核卵中，获得了生长正常并能 传代的鲤鲫核质杂种鱼。该研究成果于1980年4月发表在 《中国科学》上。 童第周 （1902-1979）  1981年，中科院水生所将三倍体鲫的肾细胞核移植入二倍 体鲫的去核卵中，获得三倍体克隆鱼，并发育成成体，证 明成年鱼的体细胞核也具有发育成个体的全能性。研究论 文发表在1986年的 《水生生物学报》上，这是世界上第一 次报道的体细胞克隆动物。这比英国克隆羊 “多莉”的出 现早15年。但是，这一成果没有在国际期刊上发表，没能 引起人们的关注。