基因芯片技术简介指导.pptVIP

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基因芯片技术简介 ;一、基因分析芯片开发的动力 遗传信息迅猛增长 随着人类基因组(测序)计划(Human genome project)的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展,越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定,基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而,怎样去研究如此众多基因在生命过程中所担负的功能就成了全世界生命科学工作者共同的课题。为此,建立新型杂交和测序方法以对大量的遗传信息进行高效、快速的检测、分析就显得格外重要了。 ;; 压电打印原位聚合技术其装置与普通的彩色喷墨打印机并无两样,所用技术也是常规的固相合成方法。即,将墨盒中的墨汁分别用四种碱基合成试剂替代,支持物经过包被后,通过计算机控制喷墨打印机将特定种类的试剂喷洒到预定的区域上。冲洗、去保护、偶联等则同于一般的固相原位合成技术。如此类推,可以合成出长度为40到50个碱基的探针。 优点: 设备廉价,技术相对简单,反应产率高 缺点: 点阵密度低,易产生交叉污染; “点膜”型 合成工作用传统的DNA固相合成仪完成,只是合成后用特殊的自动化微量点样装置将其以比较高的密度涂布于硝酸纤维膜、尼龙膜或玻片上。支持物应事先进行特定处理,例如包被以带正电荷的多聚赖酸或氨基硅烷,以便能够牢固地结合寡核苷酸分子。该方法是目前大多数中小型公司所采用的方法。 优点:设备廉价,技术简便,研制周期短,灵活性高 缺点:点阵密度低 ;从支持物来分主要有:   薄膜型 如聚丙烯膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜等。这种类型“芯片”的点阵是通过“点膜”形式制作的,并通过一定的方法使探针能够牢固地结合于其上,整个过程类似于斑点杂交技术(如CloneTech公司)。   玻片型 这种芯片的点阵是通过原位合成技术制作的,点阵密度很高,所以必须借助于特殊的仪器对测定结果进行解读和分析。当前具有此类产品研制能力的公司很少(如Affimetrix公司)。   ; 微板型 这种芯片实质上是一种具有高密度、小容量测试孔的小型酶联免疫检测板(如PE公司等)。   ; 集成电路型 将杂交技术与微电子技术结合于一体有目的地通过电子装置检测或控制DNA等生物大分子的作用过程(如Nanogen公司) ;4. 基因芯片研制的总体蓝图 ;三、基因芯片的主要应用 1 基因表达检测 拟南芥、酵母基因表达研究等 2 突变检测 BRCAⅠ基因外显子11]、CFTR基因、β-地中海贫血、酵母突变菌株、HIV-1逆转录酶及蛋白酶基因等的突变检测等 3 基因组多态性分析 人类基因组单核苷酸多态性的鉴定及分型,人线粒体16.6kb基因组多态性的研究等 4 基因文库作图 通过确定重叠克隆的次序从而对酵母基因组进行作图 ;5 及杂交测序 6 Etc.

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