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临床分子生物学检验 1.DV A 的一级结构是由哪种化学键连接？ 两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核苷酸间： 3’-5 ’磷酸二酯键 2.可以出现在人体循环系统中的游离核苷酸是？ 脱氧核苷酸，核糖核酸 3.原核生物 DNA 的复制方式是？ θ型半保留复制 4.核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白？各自的作用有？ H2A 、H2B 、H3、 H4 ：核心颗粒，形成核小体。 H1 ：连接线上，锁定核小体、参与包装 5.PCR 体系中抑制 Taq 酶活性的物质有哪些？过量加入什么会减少 Mg2+ 浓度导致 Taq 酶活性降低？ 游离的 Mg 2+浓度； dNTP 、引物和模板 DNA 等中的磷酸基团，螯合剂如 EDTA 均可与镁离子结合减少 Mg 2+浓度。 6.PCR 扩增时，链的延伸从什么地方开始？对于引物是哪一端？模板链呢？ 从引物的 3 ’端开始，方向 5 ’到 3’；模板 DNA 序列的 3’端； 3 ’端 7.在波长 260nm 的紫外线下， A 值 =1 时双链 DNA 的浓度大约相当于？ 50ug/ml 的双链 DNA 。（40ug/ml 的单链 DNA 或单链 RNA ，33ug/ml 的单链寡聚核苷酸）（紫外分光 光度法，核酸浓度的鉴定） 计算公式： 双链 DNA ＝ 50 ×A260 样本×稀释倍数 ÷1000 （ug/ul ） 单链 DNA ／RNA ＝ 40 ×A260 样本× 稀释倍数÷ 1000 （ug/ul ） 单链寡聚核苷酸 DNA ＝ 33 ×A260 样本 ×稀释倍数／ 1000 （ug/ul ） 8.关于基因的定义正确的是？ 能编码有功能的蛋白质多肽链或合成 RNA 所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。 是遗传的结构和功能单位。 一个基因大都包括编码蛋白质多肽链或 RNA 的编码序列， 保证转录和加工所必须的调控序列 （启动子， 增强子）， 5 ’端、 3 ’端非编码序列。 9. β—地中海贫血患者的基因缺陷主要是？ 基因突变中的点突变 10.Taq 酶的特性有？ 有很高的耐热稳定性 酶量增加使反应特异性下降，酶量过少影响反应产量； Taq DNA 聚合酶无 3′→ 5 ′外切酶活性，因而无校正功能，在复制新链的过程中会发生碱基错配 ； Taq DNA 聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为 1/30000 ，碱基替换率为 1/8000，因此扩增的片段越 长，错配的机率越高。 11.实时荧光定量 PCR 技术中非特异性荧光染色技术？ SYBR Green I 12.人类基因组 DNA 多态性的形式？ 限制性片段长度多态性（ RFLP ）；短序列重复序列（ STR ）;单核苷酸多态性（ SNP ） 13.常用于菌种鉴定的分子标志物是？ 16sRNA 14.真核生物染色体的 DNA 三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是？ 15.原核生物 RNA 聚合酶的特性有？ 原核生物细胞中只有 1 种 RNA 聚合酶，可参与合成 mRNA 、tRNA 和 rRNA 。 RNA 聚合酶催化聚合反应时需要 Mg 2+或 Mn2+ 。 该酶无校正功能。 16.PCR 反应的特异性取决于？ 引物 17.DNA 的变性是指？ 在某些理化因素作用下， DNA 双链解开成两条单链的过程。 变性后其它理化性质变化： 增色效应 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 18.参与 DNA 复制的酶有哪些？ （1）DNA 聚合酶 （2 ）拓扑异构酶： :兼具内切酶和连接酶活力， 能迅速将 DNA 超螺旋或双螺旋紧张状态变成松驰状态， 便于解链。 (3 ）DNA 解链酶 （4 ）单链结合蛋白 (SSB) ：结合在解开的 DNA 单链上，防止重新形成双螺旋。 (