新高考高中生物核心专题突破：基因工程和细胞工程.pdf

实用文档 用心整理 第 1 讲 基因工程和细胞工程 [考纲要求 ] 1.基因工程的诞生 ( Ⅰ)。2. 基因工程的原理及技术 (含 PCR 技术 )( Ⅱ)。3.基因工 程的应用 ( Ⅱ) 。4. 蛋白质工程 ( Ⅰ)。5. 植物的组织培养 ( Ⅱ) 。6. 动物细胞培养与体细胞克隆 ( Ⅱ)。 7. 细胞融合与单克隆抗体 ( Ⅱ)。8.实验： DNA 的粗提取与鉴定。 1 千里之行 始于足下 实用文档 用心整理 1 ．基因工程 (1) 基因工程的 3 种基本工具 ①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割 DNA 分子。 ② DNA 连接酶： a. Ecoli· DNA 连接酶只能连接黏性末端； b.T 4 DNA 连接酶能连接黏性末端 和平末端。 2 千里之行 始于足下 实用文档 用心整理 ③载体：需具备的条件包括： a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制； b. 有一个至多个限制 酶切割位点； c.具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。 (2) 获取目的基因的途径：①从基因文库中获取；②利用 PCR 技术扩增；③化学方法直接人 工合成。 (3) 基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子及标记基因等。 (4) 将目的基因导入受体细胞 ①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法 (双子叶植物和裸子植物 ) 、花粉管通道法、 基因枪法 (单子叶植物 )。 ②动物：受精卵——显微注射技术。 ③微生物：细菌 (常用大肠杆菌 )——感受态细胞法 (钙离子处理法 ) 。 (5) 目的基因的检测与鉴定方法 ①检测目的基因是否插入转基因生物的 DNA 上： DNA 分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出 mRNA ：分子杂交技术。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。 ④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。 3 千里之行 始于足下 实用文档 用心整理 易 混 辨 析 ①限制酶≠ DNA酶≠解旋酶 限制酶的作用是识别双链 DNA 分子上某种特定的核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断 开； DNA 酶的作用是将 DNA 水解为基本组成单位；解旋酶的作用是将 DNA 两条链间的氢 键打开形成两条单链。 ② DNA 连接酶≠ DNA聚合酶 DNA 连接酶能连接两个 DNA 片段，而 DNA