基因工程的基本操作程序教案.docx

学习好资料欢送下载1．2基因工程得根本操纵步伐【课标要求】1．简述基因工程根本操纵步伐得四个 学习好资料 欢送下载 1．2 基因工程得根本操纵步伐 【课标要求】 1．简述基因工程根本操纵步伐得四个步调 2．实行计划某一转基因生物得研制历程； 【本节重难点】 重点：基因工程根本操纵步伐得四个步调 难点：（ 1）从基因文库中获取目得基因 （ 2）利用 PCR技能扩增目得基因 【学习历程】 一、基因工程得根本操纵步伐简述 ①目得基因得 ② ③将目得基因 ④目得基因得 ； 得构建； ； ； 二、基因工程得根本操纵步伐 （一）目得基因得获取 1．目得基因：重要为指 得因子； 2．原核细胞与真核细胞得基因布局 （ 1）原核细胞得基因布局 得基因，也可以为一些具有 作用 （ 2）真核细胞得基因布局 3．目得基因得获取 目得基因可以从 中别离出去，也可以用 合成； 第 1 页，共 8 页 学习好资料欢送下载常用得要领有以下几种：（ 1）从基因文库中获取目得基因①基因组文库与局部基因文库（如cDNA文库）基因组文库文库范例 文库巨细 基因中启动子 基因中内含子 基因几多物种间 学习好资料 欢送下载 常用得要领有以下几种： （ 1）从基因文库中获取目得基因 ①基因组文库与局部基因文库（如 cDNA文库） 基因组文库 文库范例 文库巨细 基因中启动子 基因中内含子 基因几多 物种间得基因交换 文库 cDNA cDNA文库 基因组文库 ②从基因文库中得到目得基因， 可以凭据一些信息， 如凭据基因得 、 基因得 基因得 （ 2）利用 、基因在染色体上得 等特性； PCR技能扩增目得基因 、基因得 ，以及 ① PCR为 技能， 为 得缩写； ②原理： ；， ③条件：有一段已得目得基因得核苷酸序列，以便凭据这一序列合成 ④条件： DNA模板、 ⑤扩增历程： ； ； 第 2 页，共 8 页 学习好资料欢送下载a．变性（b．退火（ c．延伸（Taq 酶得特点为℃）：目得基因℃）：℃）：在DNA受热变性后接连为单链与单链相应互补序列联合 得作用下举行延伸；PCR技能与 DNA复制得比拟：PCR技能DNA复制原理相同 点 学习好资料 欢送下载 a．变性（ b．退火（ c．延伸（ Taq 酶得特点为 ℃）：目得基因 ℃）： ℃）：在 DNA受热变性后接连为单链 与单链相应互补序列联合 得作用下举行延伸 ； PCR技能与 DNA复制得比拟： PCR技能 DNA复制 原理 相 同 点 质料 条件 解旋方法 不 同 点 场合 酶 效果 （ 3）化学法直接合成 实用于基因比拟 ，核苷酸序列又 ； （二） ——基因工程得焦点 1．基因表达载体得构建，其目得为使目得基因在受体细胞中能 ，并 且可以 2．基因表达载体 ，同时，使目得基因可以 ； = + + + （ 1）启动子：为一段有特别布局得 ，位于基因得 ，它为 ，最 辨认与联合得部位，有呢它才气驱动基因 终得到所必要得卵白质； （ 2）停止子：也为一段有特别布局得 于一盏赤色信号灯，使 （ 3）标志基因： 作用为为呢 ，位于基因得 在所必要得地方制止下去； ，相称 ，从而将含 有目得基因得细胞 出去，如 基因； （同、差别）种限定酶去切目得基因与 3．构建基因表达载体得历程：用 运载体，再用 使其毗连 , 形成重组 DNA分子； 第 3 页，共 8 页 学习好资料欢送下载（三）将目得基因导入受体细胞将目得基因历程，称为转化；受体细胞，并且在受体细胞内与得（ 1）将目得基因导入植物细胞①农杆菌转化法②③法法（ 2）将目得基因导入动物细胞①技能为将目得基因导入受体细胞得最有用要领 学习好资料 欢送下载 （三）将目得基因导入受体细胞 将目得基因 历程，称为转化； 受体细胞，并且在受体细胞内 与 得 （ 1）将目得基因导入植物细胞 ①农杆菌转化法 ② ③ 法 法 （ 2）将目得基因导入动物细胞 ① 技能为将目得基因导入受体细胞得最有用要领； ②操纵步伐：将含有目得基因得表达载体 → →得到 → 显微注射→胚胎 （ 3）将目得基因导入微生物细胞 →胚胎 →发育成具有新性状得动物 ①原核生物作为基因工程受体细胞得长处： ②大肠杆菌细胞最常用得要领： ； a．用 这种细胞称为 b．将 处置细胞，使细胞处于一种 细胞； 分子溶于缓冲液与感觉态细胞混淆， 得生理状态， 在肯定得温度下促进 感觉态细胞吸取 DNA分子； （四）目得基因得检测与判定 （ 1）检测转基因生物得 检测要领： 上为否插入呢目得基因 技能，即将转基因生物得基因组 DNA提取出去，在 ，使探针 含有目得基因得 DNA片断上用放射性同位素等作标志， 以此作为 与基因组 DNA杂交，假如出现 （ 2）检测目得基因为否 检测要领： （ 3）检测目得基因为否 检测要领：