重组DNA技术2之表达系统 .pptxVIP

重组DNA表达系统天津科技大学生物工程学院罗学刚; 体外表达：无细胞表达系统 原核表达系统：大肠杆菌表达系统等 体内表达： 酵母表达系统 真核表达系统 昆虫细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统 动物/植物表达系统（转基因动物/植物） ;体系选择;一、体外表达系统（无细胞表达系统）;体外翻译系统又称无细胞蛋白质合成系统，是一种相对胞内表达系统而言的开放型表达系统。 优点：内源型mRNA干扰很小，操作程序简单，获得重组蛋白周期很短。主要用于蛋白质快速分析鉴定；基因转录和翻译调控机理研究；分子间的相互作用的研究。 缺点： 昂贵； 操作要求高； 表达量不够高。 ;主要的体外表达系统： 1、兔网织红细胞系统，由新西兰大白兔制备。 2、麦胚提取物系统，可稳定地表达一些在兔网织红细胞中翻译受到抑制的DNA。 3、原核体外翻译系统（S30原核体外翻译系统）， E.coli S30提取物由OmpT内切酶和Lon蛋白酶缺陷的E.coli B菌株制备，所以在S30系统中表达基因可以增加产物的稳定性。 ;目前多家公司有商业化产品，常见的有： RTS E.Coli 系统; RTS100 wheat germ CECF系统 (Roche) TNT?快速偶联转录/翻译系统 (Promega)； Gold TNT? T7 Express 96系统 （Promega），该系统有SP6和T7两种类型，适合在96孔板上进行大规模高通量筛选分析； TNT ? T7 Quick for PCR DNA (promega)，PCR DNA 的TNT ? T7快速系统从PCR反应液中直接取样，无需纯化DNA，直接用于偶联的转录/翻译反应； TNT ?偶联小麦胚芽抽提系统 (promega)。;9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。6月-216月-21Sunday, June 13, 2021 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。06:39:3506:39:3506:396/13/2021 6:39:35 AM 11、一个好的教师，是一个懂得心理学和教育学的人。6月-2106:39:3506:39Jun-2113-Jun-21 12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。06:39:3506:39:3506:39Sunday, June 13, 2021 13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。6月-216月-2106:39:3506:39:35June 13, 2021 14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。13 六月 20216:39:35 上午06:39:356月-21 15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。六月 216:39 上午6月-2106:39June 13, 2021 16、提出一个问题往往比解决一个更重要。因为解决问题也许仅是一个数学上或实验上的技能而已，而提出新的问题，却需要有创造性的想像力，而且标志着科学的真正进步。2021/6/13 6:39:3506:39:3513 June 2021 17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。6:39:35 上午6:39 上午06:39:356月-21 1、Genius only means hard-working all ones life. (Mendeleyer, Russian Chemist)? 天才只意味着终身不懈的努力。21.5.265.26.202108:3008:30:57May-2108:30 2、Our destiny offers not only the cup of despair, but the chalice of opportunity. (Richard Nixon, American President )命运给予我们的不是失望之酒，而是机会之杯。二〇二一年五月二十六日2021年5月26日星期三 3、Patience is bitter, but its fruit is sweet. (Jean Jacques Rousseau , French thinker)忍耐是痛苦的，但它的果实是甜蜜的。08:305.26