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基因工程考试题库（便携版） 名词解释 同裂酶（同切点酶） ：有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷 酸靶序列，这类酶称为同裂酶。 同尾酶： 与同裂酶对应的一类限制性内切酶 , 它们来源各异，识别的靶序列也各不相同 , 但切割后都能产生相同的黏性末端 , 特称为同尾酶。 测序酶： 是经修饰过的 T7 噬菌体 DNA聚合酶，是采用缺失的方法， 从外切核酸酶结构域中除去 28 个氨基酸，这样使得 T7DNA聚合酶完全失去了 3~-5~ 外切酶活性，只有 5~-3~ 聚合酶活性，而且聚合能力很强，测序时常用此酶。 与 klenow 相比优点是 ：是双脱氧链终止法对长片段进行测序的理想用酶。 限制性核酸内切酶： 是一类能识别和切割双链 DNA分子中特定碱基系 列的核酸水解酶。 限制- 修饰系统中的限制和修饰作用 ：限制 - 修饰系统中的限制作用 是指一定类型的细菌可以通过限制性酶的作用， 破坏入侵的外源 DNA(如噬菌体 DNA等) ，使得外源 DNA对生物细胞的入侵受到限制；而生物 细胞( 如宿主 ) 自身的 DNA分子合成后， 通过修饰酶的作用， 在碱基中特定的位置上发生了甲基化而得到了修饰， 可免遭自身限制性酶的破 坏，这就是 限制- 修饰系统中的修饰作用。 限制性片段长度多态性 （ RFLP ）：当 DNA 序列的差异发生在限制性内切酶的识别位点时，或当 DNA 片段的插入、缺失或重复导致基 因组 DNA 经限制性内切酶酶解后，其片段长度的改变可以经过凝胶电泳区分，出现的这种 DNA 多态性称为限制性片段长度多态性。 星号活性： 限制性内切核酸酶识别和切割特异性位点是在特定的 条件下测定的。 当条件改变时， 许多酶的识别位点会改变， 导致识别 与切割序列的非特异性，这种现象称为星号活性。 （“非最适的 ”反应条件例如高浓度的核酸内切限制酶、 高浓度的甘油、 低离子强度、用Mn 2+取代 Mg 2+以及高 pH 值等。 )克服星号活性的方法： 维持反应体系适当的离子强度、较低的温度或酶浓度，尽可能缩短反应时间或 DNA 样品的重新处理等。 载体 (vector): 在基因操作中携带外源基因进入受体细胞的工具。克隆载体： 主要用于扩增或保存 DNA 片段，是最简单的载体。主要 片段。 T-DNA区： 即转移 DNA，能转移并整合在植物细胞核基因组上的、 决定植物形成冠瘿瘤的一段 DNA。LTS 和 RTS对于 T-DNA的转移和整合是不可缺少的。 α - 互补 ：指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整 的近操纵基因区段的 β - 半乳糖苷酶（ β -galactosidase ， 由 1024 个氨基酸组成）阴性的突变体之间实现互补。 11. cos序列（ cohesive endsite）： λ DNA 分子两端各有 12 碱基 (5′ -GGGCGGCGACCT-3 ′ )的单链互补粘性末端， 当λ 噬菌体进入细菌细胞后，其 DNA 可迅速按碱基互补配对结合形成双链环状 DNA 分子。 COS位点： 当λDNA进入细菌细胞后，便迅速粘性末端配对形成双链环状 DNA分子，这种粘性末端结合形成的双链区域叫做 COS位点 . 端粒重复序列 （ telomeric repeat，TEL ）：定位于染色体末端一段序列，用于保护线状的 DNA 不被胞内的核酸酶降解，以形成稳定的结构。 自主复制序列： 一段特殊的序列，含有酵母菌中 DNA 进行双向复制所必须的信号。 22. 多克隆位点： 含有紧密排列的多个限制性内切酶识别位点的一段 DNA 片段。 23、分子杂交： 是指在分子克隆中的一类核酸和蛋白质分析方法， 用于检测混合样品中特定核酸分子或蛋白质分子是否存在及其分子量 大小。 24、菌落原位杂交： 是将菌落或噬菌斑转到固相膜上， 原位裂解细胞后使核酸固定在膜上， 然后与探针杂交。用标记的核酸探针， 经放射自显影或非放射检测体系， 在组织细胞间期染色体上对核酸进行定位 和相对定量研究的一种手段。 26、真核细胞原位杂交： 是一项组织化学与分子杂交相结合的技术， 使探针与固定在载玻片上的细胞组织切片内的变性染色体杂交。 27、荧光原位杂交（ fluorescence in situ hybridization ，FISH ）：对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记，后用原位杂交方法与靶染色体或 DNA 上特定的序列结合，再通过与荧光素分子相偶联的单克隆抗体 （单个细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体）来确定该 DNA 序列在染色体上的位置。 28、凝胶阻滞试验： （gel retardation assay ）： 又叫 DNA迁移率变 有：质粒载体、 噬菌体载