细胞工程植物原生质体培养和体细胞杂交.pptxVIP

第十三章 植物原生质体培养和体细胞杂交;1960年，英国植物生理学家Cocking首次获得烟草叶片原生质体，酶解细胞壁法。 1971年，Nagata 和 Takebe首次从烟草叶肉组织的原生质体中诱导出再生植株。 种间或属间甚至科间完成了原生质体融合，并再生为体细胞杂种（somatic hybrid）植株。;;conventional crossing procedures can be realized by protoplast fusion ;原生质体培养 Protoplast culture;原生质体：指植物细胞脱去细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。 原生质体培养 ：指将植物细胞游离成原生质体，在适宜的培养条件下，依据细胞的全能性使其再生细胞壁，进行细胞的分裂分化，并发育成完整植株的过程。 ;原生质体培养的意义：;体细胞杂交的概念;原生质体自发融合和诱发融合;第二节 植物原生质体分离;一、原生质体分离-机械分离法;一、原生质体分离-酶解分离法;原生质体;二、原生质体的纯化;沉降法;漂浮法;不连续梯度法;叶肉原生质体分离纯化;;纯化后的叶肉原生质体;三、原生质体活力测定;四、影响原生质体数量和活力的因素;（一）供试材料;（二）酶的种类、组合和酶解时间;(三) 渗透压稳定剂;（四）质膜稳定剂;（五）pH值;（六）光照和温度;第三节 植物原生质体培养;一、原生质体培养方法 ;;双层培养法;液体浅层培养法;二、影响原生质体培养的因素;原生质体起始密度;渗透压稳定剂;培养基营养;培养条件;三、原生质体再生过程;细胞壁再生的过程;检测新壁合成的方法;;2、细胞分裂和愈伤组织或胚状体形成 ;;叶肉原生质体愈伤组织;原生质体培养过程中会发生有丝分裂不正常的现象;3、植株再生;;马铃薯原生质体再生植株;四、原生质体培养过程中的遗传变异;第四节 植物体细胞杂交;（一）化学融合;1． NaNO3 融合法 ;2．高pH-高浓度钙离子融合法;高pH-高浓度钙离子融合方法（烟草）;原生质体电融合;Fusion protoplast ;（一）杂种细胞的选择 方法：互补选择法和机械选择法 1．互补选择法 利用两个亲本具有不同的遗传或生理特性，在特定的培养条件下，只有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法。 2．机械选择法;;（二）杂种植株的鉴定;四、植物细胞质工程;主要内容;9、春去春又回，新桃换旧符。在那桃花盛开的地方，在这醉人芬芳的季节，愿你生活像春天一样阳光，心情像桃花一样美丽，日子像桃子一样甜蜜。11月-2011月-20Monday, November 2, 2020 10、人的志向通常和他们的能力成正比例。23:48:0223:48:0223:4811/2/2020 11:48:02 PM 11、夫学须志也，才须学也，非学无以广才，非志无以成学。11月-2023:48:0223:48Nov-2002-Nov-20 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。23:48:0223:48:0223:48Monday, November 2, 2020 13、志不立，天下无可成之事。11月-2011月-2023:48:0223:48:02November 2, 2020 14、Thank you very much for taking me with you on that splendid outing to London. It was the first time that I had seen the Tower or any of the other famous sights. If Id gone alone, I couldnt have seen nearly as much, because I wouldnt have known my way about. 。02 十一月 202011:48:02 下午23:48:0211月-20 15、会当凌绝顶，一览众山小。十一月 2011:48 下午11月-2023:48November 2, 2020 16、如果一个人不知道他要驶向哪头，那么任何风都不是顺风。2020/11/2 23:48:0223:48:0202 November 2020 17、一个人如果不到最高峰，他就没有片刻的安宁，他也就不会感到生命的恬静和光荣。11:48:02 下午11:48 下午23:48:0211月-20