SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量-资料.pdfVIP

SDS电泳测定蛋白质相对分子质量 实验目的 了解 SDS垂直板型电泳法的基本原理及操作技术。 学习并掌握 SDS －PAGE 法测定蛋白质相对分子量的技术。 实验原理 SDS电泳法，即十二烷基硫酸钠 — 聚丙烯酰胺凝胶电泳法，。 1．在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷多 少。 2 ．在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量的十二烷基硫酸钠（ SDS ），SDS 是一种阴离子 表面活性剂， 加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开， 并结合到蛋白质分子上 （在 一定条件下， 大多数蛋白质与 SDS 的结合比为 1.4gSDS/1g 蛋白质） ，使各种蛋白质 —SDS 复合物都带上相同密度的负电荷， 其数量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量， 从而掩盖了 不同种类蛋白质间原有的电荷差别。 此时， 蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量 大小，而其它因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。 3. 当蛋白质的分子量在