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苹果酸的酶法制备 一、苹果酸的酶法制备 （一）苹果酸生产 1、苹果酸生产机理 L- 苹果酸在生物体中普遍存在，它作为三羧酸循环的一员而参与细胞代谢。在一般生物中它只参与循 环而不会大量积累，否则会造成代谢流的阻塞。要想积累苹果酸，必须要有补充 4 碳酸的途径。理论上讲， 补充 4 碳酸的途径有两条：乙醛酸循环和丙酮酸羧化支路。 2、苹果酸生产用微生物 不同的苹果酸发酵工艺要采用不同的微生物。一步法发酵工艺采用的微生物有黄曲霉、米曲霉和寄生 曲菌；两步法及混淆发酵法采用的有华根霉、无根根霉、短乳杆霉、膜醭毕赤酵母等；酶法转变有短乳杆 菌、大肠杆菌、产氨短杆菌和黄色短杆菌等。 3、苹果酸发酵工艺 L- 苹果酸的发酵工艺大概能够分为三类：一步发酵法、两步发酵法和酶法转变。一步发酵又称为直接 发酵，它用糖类为原料，用霉菌直接发酵产生苹果酸。两步发酵法也是用糖类为原料，先由根霉发酵成富 马酸（或富马酸 -苹果酸混淆物），再由酵母或细菌转变成苹果酸。酶法转变是用富马酸（盐）或马来酸为 原料，用微生物酶（包括全细胞）转变成苹果酸。发酵方法利用了微生物酶的立体异构专一性，生产的都是 L- 苹果酸，是生物体内所存在和能够利用的构型。 （一）酶法转变工艺 酶法转变工艺相当于两步发酵工艺中的变换发酵。变换发酵是将第一步发酵生成的富马酸转变成苹果 酸；而酶法转变是用富马酸盐（一般是化学合成的）为原料，利