8核酸的降解和核苷酸代谢.pptxVIP

生物化学核苷酸的生物合成和降解Biosynthesis and Degradation of Nucleotides生命科学学院生物化学与分子生物学系白娟核酸的酶促降解核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成核酸核酸酶核苷酸核苷磷酸核苷酸酶 碱基戊糖核苷酶嘌呤分解嘧啶分解1 核酸的酶促降解核酸酶对底物的作用位点：核酸外切酶核酸内切酶对底物的选择性：核糖核酸酶脱氧核糖核酸酶限制性内切酶(具有位点专一性) p p p p p p p1.1 核酸酶1.外切核酸酶对核酸的水解位点BBBBBBBB3′3′OH5′5′牛脾磷酸二酯酶(5端外切5得3’-核苷酸)蛇毒磷酸二酯酶 ( 3端外切3得5 ’-核苷酸)GAPyPuPyPyGACU1′OH3′5′ p p p p p p p p p p2. 内切核酸酶RNase T1RNase IRNase IRNase T1Pu ：嘌呤Py：嘧啶 1.2 核糖核酸酶(RNase)只能水解RNA磷酸二酯键的酶。1.3 脱氧核糖核酸酶(DNase)脱氧核糖核酸酶：专一水解DNA。牛胰脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ)：切割ds/ssDNA，产物为以5?-磷酸为末端的寡核苷酸。牛脾脱氧核糖核酸酶(DNaseⅡ)：降解dsDNA，产物为以3?-磷酸为末端的寡核苷酸。尚未发现有碱基专一性的DNase，但有序列专一性，即限制性内切酶(restriction endonuclease)。1.4 限制性内切酶1979年，W. Arber、H. Smith和D. Nathans等发现某些细菌细胞内存在一类能识别一定序列并水解外源dsDNA的内切核酸酶。限制性内切酶能识别dsDNA分子上特定的位点，将两条链切断，形成粘性末端或平齐末端，称为限制性内切酶(restriction endonuclease)或限制酶(restriction enzyme)。大肠杆菌EcoR I对DNA的识别顺序和酶作用产物的粘性末端：限制性内切酶的命名(以EcoRI为例)DNA重组PCR(聚合酶链式反应)PCR：polymerase chain reaction扩增特异的DNA片段。核苷酸在人体内广泛分布，具有多种生物学功能：①构成核酸的基本单位--最主要功能;②储存能量,三磷酸核苷酸尤其是ATP是细胞的主要能量形式，一些活化的中间产物，如UDP葡萄糖，亦含有核苷酸成分;③参与代谢和生理调节：许多代谢过程受到体内ATP、ADP或AMP水平的调节,cAMP(或cGMP)是多种细胞膜激素受体的调节作用的第二信使;④组成辅酶,如腺苷酸可作为NAD＋、NADP＋、FMN、FAD及CoA等的组成成分;⑤活化中间代谢物,作为多种活化中间代谢物的载体.如UDP-Glc是合成糖原糖蛋白的活性原料;CDP-胆碱与CDP-二酰基甘油都是合成磷脂的活性原料;S-腺苷甲硫氨酸是活性甲基的载体等.核苷酸代谢Nucleotide Metabolism2 核苷酸的分解代谢核苷酸(nucleotide)是构成核酸(nucleic acid)的基本单位。人体所需的核苷酸都是由机体自身合成的。食物中的核酸或核苷酸类物质基本上不能被人体直接利用，需水解生成核苷、或核糖、磷酸、碱基才能进一步被细胞所利用。核苷酸的降解磷酸化酶水解酶存在广泛 存在于植物/微生物催化可逆的反应 反应不可逆作用于核糖或脱氧核糖核苷 作用于核糖核苷腺苷酸鸟苷酸嘌呤的降解腺苷酸脱氨酶次黄嘌呤核苷核苷酶次黄嘌呤鸟苷酸脱氨酶黄嘌呤黄嘌呤氧化酶尿酸脱氨可发生在核苷/核苷酸水平次黄嘌呤核苷腺嘌呤核苷黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase)FeSMoFAD一种复合黄素酶牛黄嘌呤氧化酶的单体结构次黄嘌呤黄嘌呤尿酸嘌呤核苷酸的分解代谢主要在肝脏、小肠及肾脏中进行。生理情况下嘌呤合成与分解处于相对平衡状态，尿酸的生成与排泄也较恒定。正常人血浆中尿酸含量约0.12-0.36mmol/L(2-6mg/dl)，男性平均0.27mmol/L (4.5mg/dl)，女性平均0.21mmol/L(3.5mg/dl) 。当体内核酸大量分解(白血病、恶性肿瘤等)或食入高嘌呤食物时，血中尿酸水平升高，超过0.48mmol/L(8mg/dl)时，尿酸盐过饱和形成结晶，沉积于关节、软组织、软骨及肾等处，而导致关节炎、尿路结石及肾疾患，称为痛风症。痛风的尿酸钠结晶别嘌呤醇次黄嘌呤别黄嘌呤痛风的药物治疗：别嘌呤醇鸟嘌呤黄嘌呤尿酸次黄嘌呤痛风症的治疗机制黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶别嘌呤醇（自杀底物）食物中的嘌呤含量第一类 含嘌呤高的食物 (每100g食物含嘌呤100～1000mg) 肝、肾、胰、心、脑、肉馅、肉汁、沙丁鱼、鱼卵、小虾第二类 含嘌呤中等的食物 (每100g食物含嘌呤75～100mg)鲤鱼、贝壳类、鳗鱼、熏火退、猪肉、小牛肉； 鸭、鹌鹑、火鸡