4第四章微生物发酵技术.pptxVIP

现代微生物学技术;0-10;主要内容;1 微生物工艺优化的实验设计;1.1 微生物发酵工艺的特点;1.2 试验设计中常用的术语;1.3常用的优化方法;常用的优化方法;多因子试验 多因子试验需要解决的两个问题:(1)哪些因子对响应具有最大(或最小)的效应，哪些因子间具有交互作用。(2)感兴趣区域的因子组合情况，并对独立变量进行优化;正交实验设计;均匀实验设计;Plackett-Burman法;部分因子设计法;响应面分析（response surface analysis，RSM）;2 发酵过程动力学的基本概念; X S（底物） ─→ X（菌体） ＋ P（产物）;基质的消耗速度：;;研究反应速度及其影响因素并建立反应速度与影响因素的关联;已建立动力学模型的类型;2.3.1 微生物在一个密闭系统中的生长情况：;;;;Monod方程的参数求解(双倒数法)：;例：在一定条件下培养大肠杆菌，得如下数据：;μmax，＝1.11 (h-1); Ks＝97.6 mg/L;2.4.1 初级代谢产物和次级代谢产物;2.4.2 Gaden对发酵的三分类与Pirt方程：;〖二类发酵〗 产物的形成和菌体的生长部分偶联;〖三类发酵〗 产物的形成和菌体的生长非偶联;〖Pirt方程〗 ;S; X S（底物） ─→ X（菌体） ＋ P（产物）+维持;;V: 反应器内发酵液体积(L) X: 反应器内菌体浓度(g/L) So: 流加发酵液中基质的浓度(g/L) S: 反应器内基质的浓度(g/L) F: 补料速度(L/h);;;D;连续培养的操作特性;连续培养富集微生物的原理;3 发酵过程的代谢控制;3.1 发酵过程工艺控制的目的、研究的方法和层次 3.2 发酵过程的中间分析 ;3.1.1 发酵过程的种类;1、 分批发酵 简单的过程，培养基中接入菌种以后，没有物料的加入和取出，除了空气的通入和排气。整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度等参数都随时间变化。;分批培养中微生物的生长;分批培养的优缺点;2、补料分批培养 ;补料分批培养的优缺点;3、半连续培养;4、连续培养;连续培养的优缺点;;;微生物代谢是一个复杂的系统，它的代谢呈网络形式，比如糖代谢产生的中间物可能用作合成菌体的前体，可能用作合成产物的前体，也可能合成副产物，而这些前体有可能流向不同的反应方向，环境条件的差异会引发代谢朝不同的方向进行?? 因此对发酵过程的了解不能机械的，割裂的去认识，而要从细胞代谢水平和反应工程水平全面的认识。 微生物的生长与产物合成有密切相关性，不仅表现在菌体量的大小影响产物量的多少，而且菌体生长正常与否，即前期的代谢直接影响中后期代谢的正常与否。特别是对于次级代谢产物的合成更具有复杂性。;发酵过程受到多因素又相互交叉的影响如菌本身的遗传特性、物质运输、能量平衡、工程因素、环境因素等等。因此发酵过程的控制具有不确定性和复杂性。 为了全面的认识发酵过程，本章首先要告诉大家分析发酵过程的基本方面，在此基础上再举一些例子，说明如何综合分析发酵过程及进行优化放大。;3.1.3 发酵过程研究的方法和层次;数理统计学方法：运用统计学方法设计实验和分析实验结果，得到最佳的实验条件。如正交设计、均匀设计、响应面设计。 优点 同时进行多因子试验。用少量的实验，经过数理分析得到单因子实验同样的结果，甚至更准确，大大提高了实验效率。 但对于生物学实验要求准确性高，因为实验的最佳条件是经过统计学方法算出来的，如果实验中存在较大的误差就会得出错误的结果。 ;2、研究的层次 初级层次的研究： 一般在摇瓶规模进行试验。主要考察目的菌株生长和代谢的一般条件，如培养基的组成、最适温度、最适pH等要求。 摇瓶研究的优点是工作量大，可以一次试验几十种甚至几百种条件，对于菌种培养条件的优化有较高的效率。;代谢及工程参数层次研究： 一般在小型反应器规模进行试验。在摇瓶试验的基础上，考察溶氧、搅拌等摇瓶上无法考察的参数，以及在反应器中微生物对各种营养成分的利用速率、生长速率、产物合成速率及其它一些发酵过程参数的变化，找出过程控制的最佳条件和方式。由于罐发酵中全程参数的是连续的，所以得到的代谢情况比较可信。 ;生产规模放大： 在大型发酵罐规模进行试验。将小型发酵罐的优化条件在大型反应器上得以实现,达到产业化的实现。 一般来说微生物在不同体积的反应器中的生长速率是不同的，原因可能是，罐的深度造成氧的溶解度、空气停留时间和分布不同，剪切力不同，灭菌时营养成分破坏程度不同所致。;3.2 发酵过程的中间分析;代谢参数按性质分可分三类： 物理参数：温度、搅拌