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第1讲 基因工程和细胞工程;考纲要求;限制酶;1.基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶?
基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶,克隆技术的工具酶是纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。;A.图甲中的质粒用BamH Ⅰ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B.在构建重组质粒时,可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割质粒和外源DNA
C.用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切,加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长;跟踪训练 某质粒上有Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。;(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状)的来源属于_________________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________,也不能____________________________。
(3)在构建重组质粒时,应选用________和________两种酶对________和_______________________进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。;(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。;培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有___________、_________________________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的___________作探针进行分子杂交检测,又要用____________________________________________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______________技术,愈伤组织经__________________进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加_______________________________。;考点二 动物细胞培养和植物组织培养
(2013·高考大纲全国卷) 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是( )
A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒;跟踪训练 植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用图解简单表示:;;①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④原代培养
⑤传代培养 ⑥植物体细胞杂交 ⑦细胞融合 ⑧脱分化
⑨再分化
A.①④⑤⑦⑧ B.②④⑤⑥⑧⑨
C.②⑧⑨ D.③⑥⑧⑨
(5)从图解可知,需要在培养基中加入激素调整细胞分裂分化的是________________(用字母a~e回答)阶段,若为了获得三七的细胞产物,则只需培养到________________。若为了获得三七的人工种子,则需要培养到______________。;考点三 植物体细胞杂交和动物细胞融合
(2013·高考重庆卷)下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述,正确的是( );跟踪训练 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答:
(1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体,常用聚乙二醇、____________、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行___________和__________,经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。;(3)也有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。
①酶A是指__________________,酶B是指______________。
②图中Ⅰ表示_________________________________,对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是________________________________,
Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________________________
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