巨噬细胞IL-10和TNF-α在人慢性牙周炎牙龈组织中表达的研究.pdfVIP

巨噬细胞IL-10和TNF-α在人慢性牙周炎牙龈组织中表达的研究.pdf

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暨南大学硕士学位论文 题名(中英对照):巨噬细胞 IL-10 和 TNF-α 在人慢性牙周 牙龈组织中表达的研究 IL-10 and TNF-α expression on macrophage in gingival tissue of human chronic periodontiti 中文摘要 背景及目的: 牙周病(periodontitis diseases)是发生于牙齿周围组织的炎症性疾 病,为口腔两大疾病之一,是导致牙齿脱落的主要原因。牙周炎被认为是多因 素疾病,目前认为牙周病的始动因子为牙菌斑生物膜。牙周致病菌不仅对牙周 组织造成直接损伤,还可以通过刺激、调控宿主的免疫防御系统间接损伤牙周 组织,目前认为这种免疫炎症反应对牙周组织的损伤远超过了微生物对组织的 直接作用。 巨噬细胞(microphage, Mφ)是机体防御反应的第一道防线,是固有免疫 的重要组成部分,能对细菌或异物进行识别、吞噬以及清除。IL-10 (interleukin-10)是一种多功能细胞因子,可抑制T 淋巴细胞功能以及单核/ 巨噬细胞的活化和效应作用,对不同类型的造血细胞也发挥不同的作用。IL-10 主要由 Th2 细胞产生,能有效抑制IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-12、GM-CSF、 TNF (tumor necrosis factor)等Th1 细胞因子,从而发挥抑炎作用。TNF-α 主要由活化的Mφ和 Th1 细胞分泌的细胞因子,作用于血管内皮细胞,诱导其 合成黏附因子,进而使白细胞尤其是中性粒细胞(neutrophil)以及单核细胞 (monocytes)向血管内皮细胞(endothelial cells, EC)黏附以及向组织内 游出,从而发挥抗炎的作用。IL-10、TNF-α参与了 Th 细胞免疫应答的调控过 程。目前有关Mφ表达 IL-10、TNF-α在慢性牙周炎领域尚未见报道。 本研究 通过观察慢性牙周炎的牙龈组织中Mφ表达 IL-10、TNF-α的情况,分析Mφ 分泌的 IL-10、TNF-α在牙周感染中的作用及其作用机制。研究结果将对后续 以Mφ IL-10、TNF-α为靶点研究慢性牙周炎的免疫预防提供分子理论基础和 实验依据。 方法: 选取自愿接受研究的 80 名慢性牙周炎患者,依据慢性牙周炎的分类标准分 为 4 组:1)正常对照组 20 例;2)轻度慢性牙周炎组 20 例;3)中度慢性牙周 组 20 例;4)重度慢性牙周炎组 20 例。牙龈标本采用 10 %中性福尔马林固定液 浸泡处理,浸泡时间超过 48 h,制作颊舌向5μm的牙龈组织切片。HE 染色后 光学显微镜下观察其组织学变化。采用免疫组织化学技术 (immunohistochemistry, IHC + + + ),在光学显微镜下观察组织中Mφ(CD14 )募集以及CD14 、IL-10 、 TNF-α+ 的表达,并计算出平均阳性细胞率;然后采用免疫荧光双染色 (double immunofluorescence, DIF)进行染色,在荧光显微镜及共聚焦 + + +- + + 显微镜下观察牙龈组织标本中的 CD14 -IL-10 及 CD14 TNF-α ,并计算CD14 - + +- + 2 IL-10 、CD14 TNF-α 的细胞密度(cells/mm)。采取统计学软件SPSS 13.0 对 计算所得数据作分析和处理,采用 Wilcoxon 符号秩检验、Kruskal-Wallis H 检验、Nemenyi 法检验、单因素方差分析 (one-way ANOVA)和 Pearson 相关分 析,P<0.05 时认为差异有统计学意义。 结果: 1、组织学观察结果 1)与正常对照组对比,三组慢性牙周炎患者的牙龈组织中炎症细胞均显著 增加 (P<0.01);2)

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