实验二免疫球蛋白的粗提.pptxVIP

实验一、免疫球蛋白的粗提;实验目的：;多克隆抗体血清含有多种蛋白质组分，不适用于实验室分析、检测应用。 根据实验目的不同，可按照不同的方法对有效的抗体成分进行分离、纯化。 ;盐析法原理; 盐析法沉淀抗原的机理;材料与试剂配制 1．动物血清 2．硫酸铵饱和溶液 硫酸铵 800g~850g H2O 1 000ml 加热至绝大部分溶质溶解为止，趁热过滤，置室温过夜，然后以28％NH4OH调pH至7.0（不调pH值也可以）。 注：硫酸铵以质量优者为佳，因次品中含有少量重金属对蛋白质巯基有??响。如次品必须除去重金属，可在溶液中通入H2S，静置过夜后滤过， 加热蒸发H2S即可。;3．0.01Mol/L pH7.4 PBS液 A液：0.10Mol/L NaH2PO4液 NaH2PO4·2H2O 15.60g 加H2O至 1 000.ml B液：0.10Mol/L Na2HPO4液 Na2HPO4·12H2O 35.80g 加H2O至 1 000ml 取A液19ml，B液81ml加水至1 000ml