MSC组织再生功能检测资料.docx

MSC组织再生功能检测 在机体正常的组织损伤修复过程中，MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损 伤引起的特殊信号作用下，MSC迁徙至损伤部位，在局部增殖，并依据不同的损伤信息而沿着 不同的途径分化。 MSC易于分离培养，体外增殖能力旺盛，因此，MSC是一种实用的组织修复种子细胞。 目前关于MSC的组织再生功能有两种理论：其一，将体外扩增的M5C移植到组织损伤部位， 在局部微环境作用下，定向分化为某一特定类型功能细胞，直接参与组织损伤修复过程；其二， 移植于损伤部位的细胞，分泌多种生物活性物质，包括细胞因子和细胞生长因子等，以改善组织 损伤部位再生微循环，促进宿主组织中残存的干/祖细胞增殖分化，MSC间接参与了组织修 复过程。 MSC改善组织再生微环境，表现为细胞所分泌的生物活性物质具备的多种功能，包括：（1 ） 趋化周阔的宿主干/祖细胞迁徙至损伤那位；（2）促进干/祖细胞的増殖分化；（3）抑制受 损伤细胞的凋亡；（4）促进毛细血管新生；（5）激活周围细胞金属硫蛋白酶活性，抑制 瘢痕 形成；（6 ）调节免疫细胞功能，抑制炎性反应。 目前，关于MSC组织再生功能的检测还没有一个明确的标准。在体外检测中，只能通 检测MSC分化为受损组织细胞的能力和MSC分泌修复组织损伤有关细胞因子、抗炎因子、 L=Plu营养因子等来鉴定MSC的组织再生功能，这是判定MSC组织再生功能的基础，但是这样的 评判也存在很大缺陷的，MSC在体外的培养环境和在体内微环境中存在很大差别，微环境下细 胞之间的接触作用，损伤细胞释放的因子对MSC的刺激作用和趋化作用等可能都对MSC分 泌的细胞因子种类和剂量有影响。因此，通过在各种适应症治疗时，对MSC在微环境中的组 L=P lu 《干细胞制剂质量控制和临床前硏究指导原则（试行）》相关法规中，细胞制剂的质量 检 验里面对生物学效力试验的有关规定虽然没有明确规定干细胞制剂组织再生能力的标准，但规定 涵盖了干细胞制剂的组织再生能力。 法规内容：生物学效力试验可通过检测 干细胞分化潜能、诱导分化细胞的结构和生理功 能、对免疫细胞的调节能力、分泌特定细胞因子、表达特定基因和/或蛋白等功能，判断干细胞 制剂与治疗相关的生物学有效性。 对间充质干细胞，无论何种来源，应进行体外多种类型细胞（如成脂肪细胞、成软骨细 胞、成骨细胞等)分化能力的检测，以判断其细胞分化的多能性(multipotency )。对未分化的 胚胎干细胞和iPS细胞，须通过体外拟胚胎体形成能力，或在SCID鼠体内形成畸胎瘤的能 力，检测其细胞分化的多能性(pluripotency )。除此以外，作为特定生物学效应试验，项目 申请者应提供与其治疗适应症相关的生物学效应检验内容及结果。 我对间充质干细胞组织再生能力的理解，包括两方面：1、间充质干细胞在体外定向诱导 生成组织细胞及组织的能力。2、间充质干细胞在各种适应症中发挥的组织细胞再生或分泌组 织细胞再生相关因子的能力。 第一方面间充质干细胞在体外定向诱导生成组织细胞及组织的能力，我们可以在体外进行 检测，但是第二方面间充质干细胞在各种适应症中发挥的组织细胞再生或分泌组织细胞再生相关 因子的能力，就需要在各种适应症动物模型中去检测，目前，我们可以通过跟踪做各种适应 症的其他小组的治疗进程，与他们协作，在各种适应症治疗过程中，检测组织细胞再生的相 关指标，来取得我们想要的检测结果。 目前，涉及自体或异体MSC的临床试验项目，已经获得美国国家食品药物监督管理局批 准。这些项目包括：(I )异体MSC用于造血干细胞移植后移植物抗宿主病的治疗 ；(2)异体 MSC治疗克隆氏病；(3)自体MSC治疗多发性硬化症；(4)MSC治疗肝脏纤维化；(5 )自体MSC 用于急性脊髓损伤；(6)MSC用于骨折后骨不连；(7)MSC治疗半月板损伤；(8)心脏缺血 性疾病 的治疗。上述临床试验分别接人 1—3期，在国内，相关的实验及临床研究亦获得广 泛开展，多家单位已经开展了自体或异体MSC细胞治疗项目.用于包括骨修复、心肌梗死、 外周血管病等多种疾病的预防或治疗研究。 目前间充质干细胞在体外定向诱导的组织细胞包括：骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、胰 岛P细胞、神经细胞、肝细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、肌肉细胞、脊髓基质细胞等。 中国科学院上海生命科学研究院研究员肘玉舫最新研究发现，当组织损伤发生时，受损部位 往往释放大量的“创伤信号”，并伴有多种炎症性细胞浸润和炎症因子分泌。在“创伤信号” 的作用下，间充质干细胞会被募集或动员至受损部位，发挥调控炎症反应和促进组织修复的作 用。 组织修复相关因子：HGF、SDF1、BDNF 血管形成PCR检测VEGF、PDGF 间充质干细胞具有很高的可塑性、可移植性，可用作心肌、神经元等的修