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微生物的基本知识回顾;细菌的性质;革兰氏染色——1884年丹麦医师Gram所发明 ;约40层网状肽聚糖覆盖在细胞表面，磷壁酸贯穿于肽聚糖层，形成厚约20~80nm的细胞壁； 磷壁酸贯穿其中；;内壁层：靠近细胞膜，为1~2层网状肽聚糖； 外壁层： 脂多糖（LPS）、磷脂层和脂蛋白层；;脂多糖的结构模型;细菌的特出结构;细菌的特出物质;2、菌落（colony）：单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体。 菌落单位为CFU ( Colony-Forming Units )。 ;3 细菌纯培养的群体生长规律 ;球菌（直径）： 0.5 ~ 1 mm 杆菌（直径×长度）： 0.2~ 1 mm × 1~ 5 mm;细菌菌落 放线菌菌落 霉菌菌落;2010年版中国药典微生物检验主要增修订内容;1.微生物检验培养基质量控制技术;1.1培养基制备过程中的注意事项;培养基制备过程中的注意事项;培养基制备过程中的注意事项;培养基制备过程中的注意事项;培养基制备过程中的注意事项;1.2 培养基质量控制（2010版药典）;1.2.1培养基适用性检查的基础;1.2.2 计数培养基适用性检查; 1.2.2 计数培养基适用性检查;菌落计数法证明培养基生长能力USP;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查 ——促生长能力检查;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查 ——促生长能力检查;USP控制菌检查用固体培养基能力检查：;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查 ——抑制能力检查;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查 ——指示能力检查;1.2.3 控制菌检查用培养基适用性检查 ——指示能力检查;典型特征;典型特征;典型特征;典型特征;培养基质量控制（2010版药典）;2.菌种的质量控制2.1 概念; 中国医学菌种保藏中心提供的标准菌株; 美国国家菌种保藏中心提供的标准菌株; 法国生物梅里埃公司提供的商业派生菌??（Bioball);低温冷冻保藏的标准储备菌株;低温蜡封保藏的标准储备菌株 ; 我所制备的工作菌株;中国药典2010年版 在方法的附录中对菌种的规定同2005年版 在新增的“药品微生物实验室规范指导原则”中对菌种有了较为明确的规定 允许使用标准菌株和商业派生菌株 标准菌株应按保藏机构提供的说明进行复活 标准储备菌株应进行纯度和特性确认 标准储备菌株建议采用低温冷冻干燥、液氮贮存或超低温冷冻保藏的方法 标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株 冷冻菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用 工作菌株不可替代标准菌株，商业派生菌株仅可用作工作菌株;菌种鉴定 简单的讲可以采用目前比较成熟的商品化鉴定技术，如API鉴定条 基本程序为： 对疑似菌种进行纯培养 进行染色镜检 根据染色情况，并结合显色培养基等鉴定的初步信息，选择合适的鉴定条 根据操作说明书，得到各生化反应的鉴定结果，通过查阅检索表，得到菌种鉴定的初步结果 也可以采用半自动或全自动的微生物鉴定系统 ;菌种的管理;菌种的采购 每年年底，由实验室菌种管理人员提出下一年度菌种采购的计划，计划购置的菌种一般为药典收载的标准菌种，填写请购单，经批准后，由所采购部门向指定的菌种保藏机构购置。 所购菌种均为冷冻干燥菌种。 采购部门购入菌种后，应及时移交实验室。实验室菌种管理人员应仔细核对菌种发放单和冷冻干燥菌种管标签等各项信息，确认无误后，置4～6℃暂存。 ;菌种的复苏 菌种在打开前应仔细核对标签上菌名、菌号。并注意一株菌种使用一套打开用具，严防交叉污染。 菌种复苏应在生物安全柜内操作。 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、生孢梭菌和白色念珠菌可同时接种液体培养基和琼脂培养基斜面，枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、藤黄微球菌和黑曲霉可接