实验三 石蜡切片制作2演示课件.pptVIP

石蜡切片制作--冲洗、脱水、包埋、切片;1、取材 小鼠新鲜尸体上取脾、肌肉、肝等组织； 2、固定 将取出的材料投入预先配好的4％中性甲醛固定 液，使细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后自溶 或细菌分解，从而保持细胞本来的形态结构； 3、冲洗 （本次实验本步骤省略）;4、脱水 将固定好的材料置于一般用由低浓度到高浓度的酒精脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份：75%乙醇，过夜→85%乙醇，1h→95%乙醇，1h→100%乙醇Ⅰ，30 min→100%乙醇Ⅱ，30 min→100%乙醇Ⅲ，30 min?? 5、透明 再将组织块按以下程序置于透明：二甲苯Ⅰ（Ⅴ酒精：Ⅴ二甲苯=1：1），30min→二甲苯Ⅱ，30min→二甲苯Ⅲ，30min； 6、浸蜡 将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中浸蜡：石蜡Ⅰ(Ⅴ二甲苯：Ⅴ石蜡=1：1)，30min→石蜡Ⅱ，30min?→石蜡Ⅲ，30min； 7、包埋 用加热的弯头镊子轻轻夹取已经过浸蜡的组织块，平正地置放于包埋底模的中央处，加入已溶化的石蜡，迅速放在冷台上，待包埋底模内的熔蜡凝固后，将一体的蜡块和包埋盒从包埋模具内取出，备用。;8、切片 包埋好的蜡块用刀片修成规整的方形或长方形，夹在轮转式切片机的蜡块钳内，使蜡块切面与切片刀刃平行，旋紧。通常切片厚度为4-7μm，切出一片接一片的蜡带，用毛笔轻托轻放在纸上；切取可供使用的蜡片，置与温水内展片。 9、贴片与烤片 采用水捞片法将展好的蜡片置于载玻片上，打开烤 箱，设定60℃，烤片2小时，备用。 ;石蜡包埋的注意事项;写一份完整的石蜡切片制作实验报告。