转录和转录组学课件.ppt

调控机制 ? I 基因编码产生阻遏蛋白，阻遏蛋白为四聚 体，在没有乳糖的条件下，阻遏基因与操 纵基因结合。当有乳糖存在时，经透酶作 用进入细胞，在 β - 半乳糖苷酶催化下转变成 半乳糖，后者作为诱导剂（ inducer ）与阻 遏蛋白结合，使阻遏蛋白与操纵基因解聚， 结构基因转录。 Four States of the Lac Operon LacI Lactose Glucose - - + + - CAP-cAMP - + + ? 阿拉伯糖操纵子（ ara operon ） 结构特点 ? 结构基因 B 、 A 、 D ，分别编码异构酶 （ isomerase ）、激酶（ kinase ）、表位 酶（ epimerase ），催化阿拉伯糖转变为 5- 磷酸木酮糖 ? 调控区 由启动子（ P ）、起始区（ I ）和 操纵基因（ O ）构成 CAP 调控机制 ? C 基因是调节基因，编码调控蛋白 AraC ， AraC 蛋白单独存在时，结合到 araO 1 和 araO 2 ，表现出负调控；阿拉伯糖使 AraC 蛋白变构，结合到 araI 上，表现正调控。在 ara 操纵子基因表达调控中， CAP 蛋白的调 控作用不显著。 The Arabinose Operon Arabinose present, Glucose absent, operon ON No Arabinose present, operon OFF This loop prevents RNA transcription (NOT true for all loops) 调控作用 ? 有葡萄糖，有或无阿拉伯糖：关闭 ? 无葡萄糖，无阿拉伯糖：关闭 ? 无葡萄糖，有阿拉伯糖：开放 ? 色氨酸操纵子（ trp operon ） 结构特点 ? E.coli 的色氨酸操纵子有五个结构基因 E 、 D 、 C 、 B 、 A 基因编码三种酶，用于合成 色氨酸， ? 上游调控区由启动子（ P ）和操纵基因（ O ） 组成 ? R 基因编码阻遏蛋白 Genomic Organization of the Trp Operon 调控机制 ? 阻遏型操纵子及衰减机制。衰减子位于结 构基因 E 和操纵基因 O 之间的 L 基因中。 L 基 因的部分转录产物编码 14 个氨基酸，其中 含两个相邻的色氨酸密码子，这两个相邻 的色氨酸密码子及原核生物中转录和翻译 的偶联是产生衰减的基础。 调控作用 ? 将环境中的色氨酸消耗完，然后开始自身 合成。 Control of Gene Expression in the Trp Operon 1) The enzyme catalyzing the first step in the pathway is inhibited by Trp (feedback control). 2) In the presence of Trp, a repressor protein binds to an operator upstream of the Trp operon and shuts off transcription 3) Attenuation. There is a 160 base pair region in the Trp mRNA that causes transcription to terminate prematurely if Trp is present. 基因表达 （ gene expression ） ? 是指基因组中结构基因经过转录、翻 译等过程，合成蛋白质，进而发挥其 特定的生物学功能的全过程。 RNA 的合成 ? 4 种 NTP 、 DNA 模板、 RNA 聚合酶 ? 转录单位：结构基因、启动子、终止子 ? 按碱基配对原则 , 沿 5 ' ---3 ' 方向 ? 真核生物有三型 RNA 聚合酶 ? 分为起始阶段、延长阶级和终止阶段 ? 转录后的产物经加工成为成熟的 RNA 蛋白质的合成 ? 合成体系：氨基酸、 mRNA 、 tRNA 、核糖 体、某些酶与蛋白质因子、 ATP 、 GTP 、 Mg ? mRNA 编码区的三个相邻核苷酸组成密码子 ? tRNA 起接合器作用，核糖体是合成场所和 装配机 ? 核糖体循环：起始、肽链延长和终止 ? 翻译后加工：折叠、共价修饰、水解和亚 单位的聚合 基因表达及其调控的特点 ? 管家基因 （ housekeeping gene ） 在一个 生物个体的几乎所有细胞中持续表达的 基因。 ? 组成性基因表达 （ constitutive gene expression ） 管家基因的表达方式，较 少受环境影响，在个体各生长阶段的几 乎全