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第四章 微生物的生化试验和血清学试验;;一、概述;(二) 检验细菌的生化试验范围;(三)生化试验的方法;(四)生化试验的注意事项;二、糖醇类代谢试验;(一) 糖醇类发酵试验;常用的糖醇;2、试验方法:;3、结果观察和记录;;(二)葡萄糖氧化发酵(O/F)试验;2、方法;3、结果观察与记录;(三) V-P试验;2、试验方法;(1)奥梅拉法:;(2)贝立脱法:;(3)快速法:;3、结果观察与记录;(四)甲基红试验(MR);2、试验方法:;MR-VP试验原理及照片;3、结果观察与记录;;(五) 七叶苷水解试验;2、试验方法:;3、结果观察与记录;(六) 甘油品红试验;2、试验方法:;3、结果观察与记录;复习题;(一)靛基质(吲哚)试验
(二)H2S试验
(三)尿素酶试验
(四)氨基酸脱羧酶试验
(五)苯丙氨酸脱氨酶试验
(六) 明胶(Gelatin)液化试验;(一) 靛基质试验;2、试验方法:; 将待检菌小量接种于培养基中,于36±1 ℃培养24~48h时后,加入柯凡克试剂数滴,轻摇试管,呈红色者为阳性。
或沿试管壁缓慢加入欧-波试剂约0.5ml覆盖液面,两液接触处呈现玫瑰红色者,为阳性反应,无红色者为阴性反应。;靛基质试验原理及照片 ;3、结果观察与记录;(二) 硫化氢(H2S)试验;2、试验方法:;3、结果观察与记录;(三) 尿素酶试验;2、试验方法:;尿素酶试验图 ;3、结果观察与记录;(四) 氨基酸脱羧酶试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;;阳性反应试验管颜色变化过程;;(五) 苯丙氨酸脱氨酶试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;;(六) 明胶液化试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;复习题;四、 有机酸盐和铵盐的利用试验;(一) 枸橼酸盐利用试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;枸椽酸盐试验原理及斜面照片 ;(二) 丙二酸盐利用试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;五、 呼吸酶类试验;(一) 氧化酶试验;试剂;2、试验方法;3、结果观察与记录;;(二) 过氧化氢酶试验;2、试验方法;3、结果观察与记录;(三)硝酸盐还原试验;试剂;2、试验方法;3、结果观察与记录;(四) 氰化钾试验;2、试验方法;3、结果观察与记录; 六、毒性酶类试验;(一) 溶血试验;2、试验方法;??板法;溶血试验的溶血类型及现象;;试管法;3、结果观察与记录;(二) 链激酶试验;2、试验方法; 待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2 h内不溶化,继续放置24 h后观察。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。;3、结果观察与记录;(三)卵磷脂酶试验;2、试验方法;;B 法:
先用卵黄磷脂酶抗血清将平板涂一半,置于36 ℃待干后,将待检菌接种于未涂抗血清的一半卵黄琼脂平板上,再转划已涂过抗血清的一半,36±1 ℃厌氧培养24~ 48h,观察结果。
在未涂抗血清的一半平板上,菌落周围形成较大的不透明乳白色混浊区,在涂抗血清的一半平板上,菌落周围无不透明混浊区,为阳性。
两边均无不透明区,为阴性。;;(2)卵黄盐水法;3、结果观察与记录;(四) 血浆凝固酶试验;2、试验方法;;(2)试管法;;金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验 ;3、试管法的结果观察与记录;七、 三糖铁(TSI)试验;1、三糖铁试验的原理;制好的培养基;2、试验方法;思考题;下面照片所示2-3-4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌? ;复习题;7、简述尿素酶(Urease)试验的原理,写出其试验方法、结果的记录
8、简述氨基酸脱羧酶试验的原理,写出结果的记录、阳性反应试验管颜色变化过程和原理
9、简述氰化钾试验的原理,写出其试验方法、结果的记录和注意事项
;;第二节 血清学试验;一、抗原与抗体;(一)抗原;2、抗原的特性;(二)抗体;;2、抗体的理化性质;;;(三)抗原抗体反应;1、抗原抗体反应的化学本质;(2)、化学变化:
① 四种分子间作用力参与并促进Ag-Ab的反应
电荷引力
范登华引力
氢键结合力
疏水作用;抗原抗体反应的胶体状态的变化过程总结如下。 ; 2. 反应过程:;二、血清学反应的特点:;;三、影响血清学试验的的因素;四、 血清学反应的种类;(一)凝集试验;鲜血者红细胞;(二)、 凝集试验的方法;(三)、直接凝集试验;(2)方法步骤:
①、于洁净玻片的一端加诊断血清1滴,另一端加生理盐水1滴作为阴性对照。
②、用接种环取待检菌或血细胞的悬液分别涂于诊断血清和生理盐水中。
③、轻轻转动玻片,使其充分混匀,静置数分钟,观察结果。;;(4)诊断血清及类型;多价诊断血清:用含有两种(型)的菌体免疫
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