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- 2021-08-09 发布于湖北
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专题一 基因工程
1. 基因工程的场所？（生物体外）
2. 基因工程操作水平？（ DNA 分子水平）
3. 基因工程利用的技术？（基因重组和转基因技术）
4. 基因工程的原理？（基因重组）
5. 基因工程的别名？（ DNA 重组技术）
6. 基因工程的目的？（获得人类需要的基因产物）
7. 基因工程 /DNA 重组技术的基本工具？（限制性核酸内切酶（限制酶） ，DNA 连接酶，载体）工具酶？（限制酶， DNA 连接酶）
8. 限制酶的分布？（主要分布在原核生物中）
9. 限制酶的作用部位？（磷酸二酯键）
10. 限制酶的特异性？（限制酶只能识别特定的双链 DNA 序列，并在特定的切割位点切割）
11. 限制酶的专一性？（不同的限制酶识别不同的核苷酸序列）
12. 限制酶作用的结果是？（形成黏性末端或平末端）
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13. DNA 连接酶的种类？（ 2 类。来自大肠杆菌的 E.coli DNA 连接酶（只能催化连接黏性末端） ，来自 T 噬菌体的 T DNA 连接酶（既能
催化连接黏性末端也能连接平末端） ）
14. DNA 连接酶的作用位点？（磷酸二酯键）
15. DNA 连接酶和 DNA 聚合酶的区别？（ DNA 连接酶催化连接 DNA 片段，不需要模板， DNA 聚合酶催化连接单个脱氧核苷酸，需要
模板）
16. 载体的种类？（质粒（最常用） ， λ噬菌体的衍生物，动植物病毒）
17. 作为载体必备的条件？（能够在受体细胞中稳定存在并自我复制，对受体细胞无害，有一个或多个酶切位点，具有标记基因）
18. 质粒？（独立于拟核以外的小型环状双链 DNA 分子）
19. 标记基因的作用？常用的有？（供重组 DNA 的鉴定和选择） （四环素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因）
20. 基因工程中使用的质粒是否是天然质粒？（不是，使用的是人工改造过的天然质粒）
21. 基因工程的基本操作程序的步骤？（ 4 个，获取目的基因，基因表达载体的构建（核心工程） ，将目的基因导入受体细胞，目的基因
的检测与鉴定）
22. 获取目的基因的方法？（从基因文库中获取，利用 PCR 技术扩增，化学方法人工合成）
23. 基因文库的分类？（基因组文库和部分基因文库（如 cDNA 文库））
24. PCR （多聚酶链式反应）技术的原理？（ DNA 复制）
25. PCR 技术操作环境？（生物体外，在 PCR 扩增仪中）
26. PCR 与 DNA 复制不同之处？（前者不需要解旋酶，高温解旋，后者要用解旋酶解旋；前者的 DNA 聚合酶要求热稳定性高，后者环
境温和不需要热稳定性高的 DNA 聚合酶） （PCR 技术中需要一种特殊的酶： Taq 酶，又叫热稳定性 DNA 聚合酶）
27. 若基因较小，核苷酸序列已知，则可以通过 DNA 合成仪？（用化学方法直接人工合成）
28. 基因表达载体？（不同生物构建的表达载体有差别，但都需具备四部分：启动子，终止子，目的基因，标记基因） （复制原点）
29. 启动子和起始密码子，终止子和终止密码子？（启动子和终止子是 DNA ，起始密码子和终止密码子是 RNA 。启动子和终止子是转录
的起点和终点，起始密码子和终止密码子是翻译的起点和终点） （启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的部位）
30. 转化？（目的基因进入受体细胞并在其内稳定维持和表达的过程）
31. 将目的基因导入植物细胞的方法？（农杆菌转化法（最常用） ，花粉管通道法，基因枪法）
32. 农杆菌的特点？（农杆菌中的 Ti 质粒上的 T-DNA 可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体的 DNA 上）
33. 将目的基因导入动物细胞的方法？常用的受体细胞是？为什么？（显微注射技术） （受精卵）（受精卵全能性高）
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