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青霉素生产工艺过程 一、青霉素的发酵工艺过程 1、工艺流程 （1）丝状菌三级发酵工艺流程 冷冻管（ 25℃，孢子培养， 7 天）——斜面母瓶（ 25℃，孢子培养， 7 天）—— 大米孢子（ 26℃，种子培养 56h,1:1.5vvm ）——一级种子培养液（ 27℃，种子 培养， 24h,1:1.5vvm ）——二级种子培养液（ 27~26℃, 发酵 ,7 天,1:0.95vvm ） ——发酵液。 （2）球状菌二级发酵工艺流程 冷冻管（ 25℃，孢子培养， 6~8 天）——亲米（ 25℃，孢子培养， 8~10 天）—— 生产米（ 28℃，孢子培养， 56~60h,1:1.5vvm ）——种子培养液（ 26~25-24 ℃， 发酵， 7 天， 1：0.8vvm ）——发酵液。 2、工艺控制 （1）影响发酵产率的因素 基质浓度： 在分批发酵中， 常常因为前期基质量浓度过高， 对生物合成酶系 产生阻遏（或抑制）或对菌丝生长产生抑制（如葡萄糖和钱的阻遏或抑制，苯乙 酸的生长抑制） ，而后期基质浓度低限制了菌丝生长和产物合成， 为了避免这一 现象，在青霉素发酵中通常采用补料分批操作法， 即对容易产生阻遏、 抑制和限 制作用的基质进行缓慢流加以维持一定的最适浓度。 这里必须特别注意的是葡萄 糖的流加， 因为即使是超出最适浓度范围较小的波动， 都将引起严重的阻遏或限 制，使生物合成速度减慢或停止。目前 , 糖浓度的检测尚难在线进行 , 故葡萄糖 2 的流加不是依据糖浓度控制 , 而是间接根据 pH 值、溶氧或 C0 释放率予以调节。 （2 ）温度： 青霉素发酵的最适温度随所用菌株的不同可能稍有差别，但一般 认为应在 25℃左右。温度过高将明显降低发酵产率，同时增加葡萄糖的维持消 耗，降低葡萄糖至青霉素的转化率。 对菌丝生长和青霉素合成来说， 最适温度不 是一样的 , 一般前者略高于后者 , 故有的发酵过程在菌丝生长阶段采用较高的 温度，以缩短生长时间 , 到达生产阶段后便适当降低温度， 以利于青霉素的合成。 （3 ）pH值：青霉素发酵的最适 pH值一般认为在 6.5 左右 , 有时也可以略高或 略低一些，但应尽量避免 pH值超过 7.0, 因为青霉素在碱性条件下不稳定 , 容 易加速其水解。在缓冲能力较弱的培养基中 , pH 值的变化是葡萄糖流加速度高 低的反映。过高的流加速率造成酸性中间产物的积累使 pH值降低；过低的加糖 速率不足以中和蛋白质代谢产生的氨或其他生理碱性物质代谢产生的碱性化合 物而引起 pH值上升。 （4 ）溶氧： 对于好氧的青霉素发酵来说，溶氧浓度是影响发酵过程的一个重 要因素。当溶氧浓度降到 30%饱和度以下时 , 青霉素产率急剧下降 , 低于 10%饱 和度时 , 则造成不可逆的损害。 溶氧浓度过高，说明菌丝生长不良或加糖率过低， 造成呼吸强度下降 , 同样影响生产能力的发挥。 溶氧浓度是氧传递和氧消耗的一 个动态平衡点 , 而氧消耗与碳能源消耗成正比 , 故溶氧浓度也可作为葡萄糖流 加控制的一个参考指标。 （5）菌丝浓度： 发酵过程中必须控制菌丝浓度不超过临界菌体浓度 ,