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基因工程操作程序第1页/共11页非编码区非编码区真核细胞的 基因结构外显子：能编码蛋白质的序列内含子：不能编码蛋白质的序列编码区外显子 内含子 非编码区外显子： 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 非编码序列：包括非编码区和内含子不能够编码蛋白质的序列叫做内含子内含子： 2、真核细胞的基因结构编码区编码区下游 编码区上游 启动子终止子与RNA聚合酶结合位点有调控作用的核苷酸序列，包括位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。1.2基因工程的基本操作程序第2页/共11页为什么要获得目的基因为什么要把目的基因与载体结合受体细胞是指什么为什么要进行检测第3页/共11页基因文库的构建模式图通过对受体菌的培养而储存基因第4页/共11页由mRNA反转录形成cDNA逆转录mRNA DNA单链 DNA单链RNA – DNA杂交分子RNA – DNA杂交分子 单链DNA单链DNA双链DNA?形成氢键使RNA降解核酸酶H复制?第5页/共11页第一步：获取目的基因方法：1.从基因文库中获取目的基因。2.利用PCR技术合成DNAPCR:聚合酶链式反应.是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的. 前提条件是必须对目的基因有一定的了解，需要设计引物。 第6页/共11页 PCR原理图 第7页/共11页（1）以DNA 片段作模板，