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中药制首乌质量评价论文 １仪器与试药 １．１仪器 Ｗａｔｅｒｓ５１５高效液相仪，Ｗａｔｅｒｓ２４８７双波长检测器，ＷａｔｅｒｓＮ３０００色谱工作站，色谱柱ＴｈｅｒｍｏＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８（２５０×４．６ｍｍ，５μｍ）；ＢＰ２１１ＤＳａｒｔｏｒｉｕ电子分析天平；ＤＸＦ－１０Ａ粉碎机（广州市大祥电子机械设备有限公司）；ＧＳＹ－Ⅱ恒温水浴锅（北京市医疗设备厂）。 １．２试药 制首乌样品分别购自于陕西渭南、广西玉林、宁夏银川、河南新乡、贵州安顺、安徽六安、云南大理、云南玉溪、云南曲靖，经广州中医药大学中药鉴定教研室主任黄海波老师鉴定均为蓼科植物何首乌的炮制加工品。对照品２，３，５，４’－四羟基二苯乙烯－２－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷（批号：８２３７３－９４－２）购自成都瑞芬思生物科技有限公司，大黄素（批号：１１０７５６－２００１１０）、大黄素甲醚（批号：１１０７５８－２０１１１４）均购于中国药品生物制品检定所。甲醇、乙腈为色谱纯（美国Ｆｉｓｈｅｒ公司）；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。 ２方法与结果 ２．１性状质量比较 ２０１０版《中国药典》对制首乌的性状质量要求为：呈不规则皱缩状的块片，厚约１ｃｍ；表面黑褐色或棕褐色，凹凸不平；质坚硬，断面角质样，棕褐色或黑色；气微，味微甘而苦涩。收集到来自全国各地的制首乌九批，其外观特征，见图１；从内外部颜色、粉末颜色以及气味上对各制首乌分别进行比较，并根据各制品的粉末颜色深浅程度进行分级（表１）。从图１和表１可以看出，市售制首乌饮片的外观颜色与其粉末颜色均存在一定的差异。根据各市售的粉末颜色深浅程度进行分级的结果可知，安徽六安的样品粉末颜色为棕黑色，颜色等级最高“＋＋＋＋”；其次为颜色等级“＋＋＋”的粉末，包括陕西渭南深棕褐色、贵州安顺褐色、云南大理棕色、云南曲靖棕褐色；广西玉林、云南玉溪及宁夏银川的粉末颜色分别为淡棕褐色、淡棕色与棕绿色，颜色等级“＋＋”；粉末颜色最浅的为河南新乡，棕红色，颜色等级“＋”。造成市售制首乌饮片粉末颜色的差异可能主要受炮制程度因素影响的原因。 ２．２有效成分含量比较 ２．２．１二苯乙烯苷含量测定２．２．１．１色谱条件色谱柱ＴｈｅｒｍｏＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８（２５０×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈－水（２５：７５）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：３２０ｎｍ；柱温：２５℃。图１各市售制首乌性状质量图２．２．１．２线性关系考察精密称取二苯乙烯苷对照品，于棕色量瓶中用稀乙醇配制成每１ｍＬ含２１５μｇ的对照品溶液。分别吸取１、５、１０、１５、２０μＬ注入液相色谱仪，以测得的峰面积积分值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线（表２）。表明二苯乙烯苷在０．２１５～４．３０μｇ之间具有良好的线性关系。２．２．１．３供试品溶液的制备按药典法进行［１］。取各制首乌粉末（过四号筛）约０．２ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇２５ｍＬ，称定重量，加热回流３０分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，上清液滤过，取续滤液，即得供试液。２．２．１．４精密度试验精密吸取同一样品溶液重复进样６次，二苯乙烯苷峰面积积分值的ＲＳＤ为１．５３％。２．２．１．５重现性试验精密称取同一样品６份，按供试品溶液制备方法处理，进行含量测定，二苯乙烯苷含量的ＲＳＤ为２．４１％。２．２．１．７二苯乙烯苷含量测定取适量供试品溶液，用０．４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液１０μＬ进样，测定峰面积，计算样品中二苯乙烯苷含量。９个市售制首乌样品二苯乙烯苷含量测定结果（表３）。根据表３的结果，市售制首乌中二苯乙烯苷与蒽醌类成分含量存在着明显差异。９个市售制首乌中二苯乙烯苷的含量大部分符合现版《药典》对其含量限度的规定（制首乌不得少于０．７０％），其中含量最高的为云南大理３．３１％；而只有河南新乡的含量为０．２４％，低于药典规定。２．２．２游离蒽醌含量测定２．２．２．１色谱条件色谱柱ＴｈｅｒｍｏＨｙｐｅｒｓｉｌＣ１８（２５０×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－０．１％磷酸溶液（８５：１５）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：２５４ｎｍ；柱温：２５℃。２．２．２．２线性关系考察精密称取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品，精密称定，加甲醇分别制成每１ｍＬ含大黄素４８．０μｇ、大黄素甲醚２１．２μｇ的溶液。分别吸取１、５、１０、１５、２０μＬ注入液相色谱仪，以测得的峰面积积分值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线（表２）。表明大黄素在４８．０～９６０ｎｇ之间具有良好的线性关系，大黄素甲醚在２１．２～４２４ｎｇ之间具有良好的线性关系。２．２．２．３供试品溶液的制备按药典法进行［１］。供试品溶液的制备，取本品