血浆蛋白的测定及临床意义
血浆蛋白质测定方法的进展:
(一)、比色法:例如总蛋白的测定方法:双缩脲反应法;白蛋白的测定方法:溴甲酚绿法。
(二)、电泳法:是进一步分离蛋白质的方法。
(三)、免疫测定法:是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的分析方法。
特点:(1)特异性好:即某一抗原只与其相应的抗体起反应。
(2)敏感性高,可检测出纳克(ng)水平的的量。
免疫测定法包括:
1、 免疫扩散法:敏感度在ug/ml,因此只能用于检测含量较高的蛋白质。且操作繁琐、时间长,需18-48小时。
2、 免疫电泳法:是区带电泳与免疫扩散相结合的方法。一般不能定量,仅用于检测异常蛋白成分。
3、 免疫浊度法:基本原理是:当可溶性抗原与相应抗体特异结合,在二者比例合适,并有一定浓度的电解质存在时,可以形成不溶性的免疫复合物,即沉淀反应。
免疫浊度法的原理:
免疫浊度法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。
透射免疫比浊法:当一定波长的光线通过抗原抗体反应混合液时,被形成的免疫复合物反射、遮挡或吸收而减弱。在一定范围内,吸光度(A)与IC量呈正相关。因此当抗体量固定时,根据吸光度可计算出抗原量。要求形成的IC达到一定的数量,而且分子颗粒较大,否则难以精确测定,因此检测灵敏度相对较低。
散射免疫比浊法:光线通过检测溶液时,被反应形成的抗原抗体复合物折射而部分偏转,产生散射光,散射光强度(I)与样本的IC
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