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- 2021-08-25 发布于广东
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; 基因载体系统;基本概念:即病毒载体介导基因技术,一种高效的基因转移工具,将外源基因包装到天然病毒的外壳中,利用病毒对宿主细胞的感染性,将外源基因导入特定细胞中,广泛应用于基因诊断和基因治疗。;病毒载体的优势;存在的问题;;;;?;腺病毒载体 ;腺病毒系统的包装;慢病毒载体;慢病毒载体的特性; ;HIV-1;慢病毒载体系统组成;表达载体部分与包装成分互补,仅含有包装、逆转录和整合所需的HIV-1顺式作用元件, 5’端LTR和全部5’端非翻译区域。
包膜表达质粒使用水疱性口炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)用来代替了原病毒的env基因。;三代慢病毒载体;lentivirus 包装流程;逆转录病毒载体;逆转录病毒载体的特点;;逆转录病毒载体包装原理;
;第一代包装细胞
基因组整合了仅缺失包装信号的MLV前病毒基因组,包装的病毒颗粒为单嗜性。
将其包膜蛋白env基因换成鼠4070A病毒的双嗜性包膜蛋白,就产生了能分泌双嗜性病毒的包装细胞。但这个细胞系所含的包装结构仅仅缺失Ψ信号,只要它们与载体之间发生一次重组,就可以产生有复制能力的野生型病毒,安全性很差。
第二代包装细胞
前病毒基因组除了包装信号缺失外,5’LTR的5’端顺序也缺失,病毒剪接供体上游部位进一步缺失,3’LTR被SV40的转录终止多聚腺苷酸信号取代。经过这样的改造,包装细胞与载体系列之间的共同顺序只存在于紧接gag起始密
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