BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版.pdf

BCA 蛋白浓度测定试剂盒 说明 23225 蛋白质化验试剂盒：为 500 试管或 5000 微孔板的检测提供充足的试剂 23227 蛋白质化验试剂盒：为 250 试管或 2500 微孔板的检测提供充足的试剂 试剂盒组分： BCA 试剂 A ， 1000 mL (No. 23225 产品中 ) 或 500mL ( No. 23227 产品中 ) ，碳酸钠， 碳酸氢钠，二喹啉甲酸，酒石酸钠溶于 0.1 M 氢氧化钠中。 BCA 试剂 B , 25 mL, 包括 4%硫酸铜 一次性标准白蛋白 , 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿 , 包含 2 mg/ mL 牛血清白蛋白 (BSA) 存 在于 0.9% 盐和 0.05% 叠氮化钠 中。 储存：以上试剂保持在室温下储存和装运 注意： 如果试剂 A 或 试剂 B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象， 可以通过缓慢加 温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。 目录 介绍 ……………………………………………………………………………………… ..1 准备标准试剂和工作试剂 ……………………………………………………………… ..2 准备试管 ………………………………………………………………………………… ..3 准备微型版 ……………………………………………………………………………… .. 3 故障检修 ………………………………………………………………………………… ..4 有关美国热电其他产品 ………………………………………………………………… ..5 附加信息 ………………………………………………………………………………… ..5 参考文献 ………………………………………………………………………………… ..6 介绍 美国热电（ Thermo ）公司的 BCA 蛋白浓度测定试剂盒 是基于二喹啉甲酸 (BCA) 通过比色检 测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了 Cu2 使 其显著减少转变为 Cu1 （缩二脲反应）。用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏 感的比色杯中的 Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过 BCA 的两个分子和亚铜离子 螯合作用形成的。这种水溶性复合物在 562nm 处有强吸收峰。在大的活性范围内 (20-2000 g / mLμ ）几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。 BCA 法不是真正的终点的方法 ；也就 是说，最终颜色继续发展。孵化之后 , 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大 量样本。 大分子结构的蛋白质 ,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸 (半胱氨酸 ,胱氨酸， 色氨酸和酪氨 酸) 据说是与 BCA 形成颜色产物的原因。因此 ,蛋白浓度的测量通常要参照标准的一个常见 的蛋白质如牛血清白蛋白。 一系列已知浓度的蛋白质稀释液是为与之相近的未知蛋白质浓度 测定准备的。 因为每一个未知浓度的测定都需要基于标准曲线。 如果需要将一个未知蛋白精 确定量， 选择一个与未知蛋白特性相似的标准蛋白是可取的。 例如， 当测定免疫球蛋白时牛 血清丙种球蛋白可以被当做标准蛋白。以下给出了两种检测过程： 其中