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微生物学沈萍考试重点 微生物学沈萍考试重点 微生物学沈萍考试重点 微生物学考试复习要点 第一章 绪论 1、微生物学的定义 微生物学一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学。 2、微生物的种类 ①无细胞结构不可以独立生活的病毒、亚病毒因子（卫星病毒、卫星 RNA 和朊病毒）； ②原核细胞结构的细菌、古生菌； ③真核细胞结构的真菌（酵母菌、霉菌、覃 菌等）、单细胞藻类、原生动物等。 3、微生物生命现象的特征和共性 ①微生物拥有其余生物不具备的生物学特征、代谢门路和功能； ②微生物拥有其余生物共有的基本生物学特征； ③易操作性：微生物拥有个体小、结构简单、生长周期短、易大批培育、易变异、重复性强等优势。 4、微生物的发现 荷兰商人安东 ?列文虎克利用自制的显微镜发现了微生物世界。 5、微生物学发展过程中的重要事件 ①1867：Lister 创办了消毒外科； ②1890：Von Behring 制备抗毒素治疗白喉和破伤风； ③1892：IV anowsky 供给烟草花叶病是由病毒惹起的凭证； ④1928：Griffith 发现细菌转变； ⑤1929：Fleming 发现青霉素； ⑥1977：Woese 提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特别类群； ⑦1995：第一个独立生活的细菌（流感嗜血杆菌）全基因组序列测定达成； ⑧1996：第一个独立生活的古生菌（詹氏甲烷球菌）基因组测序达成； ⑨1997：第一个真核生物（啤酒酵母）基因组测序达成。 6、微生物学发展的奠定者 ①巴斯德和科赫是微生物学发展的奠定者。 ②巴斯德的贡献 a 完全否认了“自生说”：巴斯德用有名的曲颈瓶实验完全否认了“自生说”，并此后成立了病原学说，推 动了微生物学的发展； b 免疫学—预防接种：巴斯德研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可引发免疫性，以预防鸡霍乱病，他为人类 防病、治病作出了重要贡献； c 证明发酵是由微生物惹起的 d 其余贡献—巴斯德消毒法和家蚕融化病问题。 ③科赫的贡献 a 证明炭疽杆菌是炭疽病的病原菌； b 发现肺结核的病原菌； c 提出了证明某种微生物能否为某种疾病病原体的基根源则——科赫原则； d 用固体培育基分别纯化微生物的技术； e 配制培育基。 ④科赫原则 a 在每一相同的病例中都出现这类微生物； b 要从寄主分别出这样的微生物并在培育基中培育出来； c 用这类微生物的纯培育接种健康而敏感的寄主，相同的疾病会重复发生； d 从实验发病的寄主中能再度分别培育出这类微生物。 第二章 微生物的纯培育和显微技术 1、无菌技术的观点 在分别、转接及培育纯培育物时防备其被其余微生物所污染，其自己也不污染操作环境的技术被称为无菌技术。 2、最常用的灭菌方法 高压蒸汽灭菌 3、接种操作 ①接种环在火焰上灼烧灭菌； ②烧红的接种环在空气中冷却，同时翻开装有培育物的试管； ③用接种环蘸取一环培育物转移到一装有无菌培育基的试管中，并将试管从头盖好； ④接种环在火焰上灼烧，杀灭残留的微生物。 4、用固体培育基获取纯培育 ①涂布平板法 a 先将已消融的培育基倒入无菌培育皿，制成无菌平板； b 冷却凝结后，将必定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌涂布棒将菌液分别至整个平板 表面； c 培育后挑取单个菌落。 ②稀释倒平板法 a 先将待分别的资料用无菌水作一系列的稀释（如 1:10、1:100、1:1000、1:10000? ? ）； b 分别取不同稀释液少量， 与已消融并冷却至 50℃左右的琼脂培育基混淆，摇匀后，倾入灭过菌的培育皿中， 待琼脂凝结后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培育一准时间即可出现菌落。假如稀释合适，在平板表面 或琼脂培育基中即可出现分别的单个菌落，这个菌落可能就是由一个微生物细胞生殖而成的； c 挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，即可获取纯培育。 ③平板划线法 a 用接种环以无菌操作蘸取少量待分别的资料，在无菌平板表面进行平板划线、扇形划线或其余形式的连续 划线； b 微生物细胞的数目将跟着划线次数的增添而减少，并逐渐分别开来，假如划线适合的话，微生物能一一分 散，经培育后，可在平板表面获取单菌落。 ④稀释摇管法 (对氧气敏感的厌氧型微生物 ) a 先将一系列盛无菌培育基的试管加热，使琼脂消融后冷却并保持在 50℃左右； b 将待分别的资料用这些试管进行梯度稀释，试管快速摇动均匀； c 冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体白腊和固体白腊的混淆物，将培育基和空气分开； d 培育后，菌落形成在琼脂柱的中间； e进行单菌落的挑取和移植，需先用一只灭菌针将液体白腊— 白腊盖拿出，再用一只毛细管插入琼脂和管壁 之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，置放在培育皿中，用无菌刀将琼脂柱切成薄片，进行察看和聚 落的移植。 5、选择培育 ①选