分子生物学常用技术.pptVIP

分子生物学常用技术;1、核酸的分类及分布 ;2、 核酸的理化性质;3、DNA的提取;◆影响因素： 物理因素：机械张力和高温 化学因素：过酸或过碱 DNAase ： EDTA 灭活残余的DNAase◆注意事项： 所有用品均需要高温高压 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制 pH要准确（以上） 动作要轻柔 避免过多的溶液转移 避免过高的温度;◆取动物组织100mg左右于样品管中,用干净的剪刀将组织块剪碎。 ◆在样品管中加入500μl TE (pH8.0)溶液,25μl 蛋白酶 K(10mg／ml）,75μl 10％ SDS，5μlRNAase（1mg/ml） ◆混匀后置56℃下消化2 小时以上（隔一定时间混匀一次）。 ◆加入等体积的饱和酚(pH8.0)溶液，轻轻颠倒混合10分钟 ◆12000 r／min 离心10分钟。 ◆小心将上层清液移至另一干净的离心管中，加入等体积的苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)，轻轻颠倒混合10分钟。 ◆ 12000r／min 离心10分钟。 ◆小心将上层清液移至另一干净的离心管中以等体积的/氯仿/异戊醇(24:1)，轻轻颠倒混合10分钟。 ◆小心将上层清液移