21微生物的实验室培养2.pptxVIP

;特点：小 简 低;;　　芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 　　芽孢又小又轻，可以随风飘散。 　　当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。;放线菌;（2）繁殖;菌　落; 细菌的菌落特征因种而异 ;菌　落;C、H、O、N、P、S;二、培养基 ; （1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。;固体培养基：菌落;液体培养基：;半固体培养基：; 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成;4.培养基的用途;1.无菌技术的概念 ;（1）消毒定义：;1.灼烧灭菌;2. 干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。 3. 高压蒸气灭菌 100kPa、121 ℃下维持15-30min.; 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手; 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手;微生物实验室培养的基本操作程序;牛肉膏蛋白胨固体培养基配方;1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎;8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。; 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术;倒平板技术; 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在???精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。 10．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。;（二）纯化大肠杆菌;平板划线的操作方法;;;;;;;;; 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。;;稀释涂布平板法;　　1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101~106的顺序编号。; 2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。;3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。;注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.; 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？; 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？;微生物的恒温培养;微生物的恒温培养;菌种的保存;四、课题成果评价 ; （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。;（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。;从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？; 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？; 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？; 需要使锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？