第三章细胞生物学研究方法.pptVIP

第三章细胞生物学研究方法;第三章细胞生物学研究方法;1、速度沉降　　速度沉降（velocity sedimentation）主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。生物颗粒（细胞或细胞器）在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。这种沉降方法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。;第三章细胞生物学研究方法;2、等密度沉降　　等密度沉降（isopycnic sedimentation）平衡法适用于分离密度不等的颗粒。细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和足够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的细胞或细胞器分离。等密度沉降通常在较高密度的介质中进行。;;不同的细胞结构分离所需的离心力;二、细胞分选技术 细胞分选技术使细胞生物学研究中一个全新的技术领域，主要用流式细胞仪对细胞或染色体进行分选，并对单个细胞或其他生物微粒进行定量分析。包括测量细胞的大小、形状、细胞DNA、RNA含量和细胞总蛋白等。 1.流式细胞术构造： 激光光源：可发出合适波长的光 流室：生物颗粒在此与鞘液相混。鞘液包裹着细胞的液滴经喷嘴流出，当液滴滴下流至适当位置，受激光照射可发出不同的光讯号。　　;讯号检测器：由光学透镜装置和光电倍增管组成，接受放大各种光讯号。并把他们转变成电脉冲讯号。 讯号分析部