实验十二 平板菌落计数法和光电比浊计数法.pptVIP

实验十二 平板菌落计数法和光电比浊计数法 一、实验目的及要求 学习平板菌落计数的基本原理和方法； 了解光电比浊计数法的原理，掌握光电比浊计数法的操作方法。 二、基本原理——平板菌落计数法 平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2-3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。 该计数方法最大的优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验，以及食品、饮料和水等含菌指数或污染程度的检测。 二、基本原理——光电比浊计数法 当光线通过微生物菌悬液时，由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内，微生物细胞浓度与透光度成反比，与光密度成正比，而光密度或透光度可以由光电池精确测出。 用一系列已知菌数的菌悬液测定光密度，作出光密度——菌数标准曲线。然后，就可以以样品液所测得的光密度，从标准曲线中查出对应的菌数。 制作标准曲线时，菌体计数可采用血细胞计数板计数、平板菌落计数或细胞干重测定等方法。本实验采用平板菌落计数法。 三、实验器材 菌种：枯草芽孢杆菌。