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第十二章蛋白质的生物合成(翻译) Protein Biosynthesis, Translation ; 翻译的模板:DNA----原始模板 RNA----直接模板 翻译的场所:核蛋白体(细胞质) 翻译过程分为起始、延长、终止三个阶段。; 第一节 蛋白质生物合成体系 原料:氨基酸 其它物质:三种RNA(mRNA、tRNA、rRNA) 各种酶和蛋白质因子 ATP和GTP 、无机离子等;遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。
原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质,为多顺反子(polycistron) 。
真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子(single cistron) 。 ;;; mRNA上存在遗传密码; 第 三 个 字 母; 开放读码框:从mRNA5’端起始密码子AUG到3’端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放读码框(open reading frame,ORF)。; 遗传密码的特点: (一)连续性(commaless) 编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码间既无间断也无交叉,如mRNA链上的碱基发生插入或缺失,可造成框移突变。 (二)简并性(degenecy) 遗传密码的简并性是指一种氨基酸有2个或2个以上的密码子为之编码的现象。 (三)通用性(universal) (四)摆动性(wobble) (图) 密码子与反密码子配对出现不严格遵守常见的碱基配对规律的情况,称为摆动配对(表12-2);;;;; 三、tRNA与氨基酸的活化 (一)氨基酰-tRNA合成酶 tRNA的3’末端-CCA-OH是氨基酸的结合位点,tRNA的功能是转运氨基酸。 1.tRNA携带氨基酸的反应如下:(氨基酸的活化) 此反应可分为两步完成: 氨基酸+ATP-E → 氨基酰-AMP-E+PPi 氨基酰-AMP-E+tRNA→氨基酰-tRNA+AMP+E; 2.氨基酰-tRNA合成酶的作用特点 a. 对aa、tRNA两种底物有高度特异性; b.有校正活性,当发生错配时,可以水解酯键,再重新与正确的底物结合。 3.氨基酰-tRNA的书写 (1) 氨基酰-tRNA完整的写法???:ala-tRNAala;met-tRNAemet;fmet-tRNAfmet等。 (2) 各种氨基酰-tRNA的生成反应如下:gly + tRNAgly + ATP → gly-tRNAgly + AMP + PPi met+tRNAemet+ATP → met- tRNAemet +AMP+PPi; (二)起始肽链合成的氨基酰-tRNA 密码子AUG为甲硫氨酸(Met)编码,同时作为起始密码。 与甲硫氨酸结合的tRNA,在真核生物中至少有两种:tRNAimet和tRNAemet ;原核生物的起始密码只能辨认甲酰化的甲硫氨酸,即N-甲酰甲硫氨酸( fMet )。; 第二节 蛋白质生物合成过程 翻译过程分为起始、延长和终止三个阶段。 一、肽链合成起始 肽链合成起始阶段,是指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物的过程。需要起始因子(IF或eIF)和ATP、GTP参与。 翻译的起始是mRNA能忠实翻译的关键步骤,也是调节蛋白质合成的部位。; (一)原核翻译起始复合物形成 (图12-3) 1. 蛋白体大、小亚基分离。 2.mRNA在小亚基定位结合; S-D序列:又称核蛋白体结合位点(ribosomal binding site,RBS),是mRNA起始密码上游的一段富含嘌呤核苷酸的序列,该序列以…AGGA…为核心。(图12-2) 3.起始氨基酰-tRNA在小亚基上就位; 4.核蛋白体大亚基结合。;; (二)真核生物翻译起始复合物形成 1.核蛋白质体大小亚基的分离; 2.起始氨基酰-tRNA结合; 3.mRNA在核蛋白质体小亚基的准确定;(图12-4A) 4.核蛋白质体大亚基结合。(图12-4) eIF2是真核肽链合成调节的关键成分。; 二、肽链的延长 肽
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